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人肺腺癌細(xì)胞腦轉(zhuǎn)移株的培養(yǎng)方式與質(zhì)量檢測(cè)!
小楊 / 2023-05-13 09:36:01


一、細(xì)胞簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-131650
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:PC14B
細(xì)胞名稱(chēng):人肺腺癌細(xì)胞腦轉(zhuǎn)移株P(guān)C14B
產(chǎn)品規(guī)格:T25培養(yǎng)瓶x1;1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量:1x10^6;1x10^6
細(xì)胞形態(tài):貼壁生長(zhǎng),上皮細(xì)胞樣
保存溫度:37℃;-198℃
運(yùn)輸方式:常溫保溫運(yùn)輸;干冰運(yùn)輸
安全等級(jí):1
用途限制:僅供科研3類(lèi)
培養(yǎng)體系:DMEM高糖培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)11995065)+10%澳洲來(lái)源的進(jìn)口胎牛血清(GIBCO,貨號(hào)10091148)+4mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM (丙酮酸鈉) +1%雙抗
培養(yǎng)溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡(jiǎn)介:人肺腺癌細(xì)胞腦轉(zhuǎn)移株P(guān)C14B取自45歲男性供體腦轉(zhuǎn)移組織。
用途:研究
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

二、培養(yǎng)方式
1、培養(yǎng)基:PC14B 專(zhuān)用培養(yǎng)基【DMEM 高糖培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào) 11995065)+10%澳洲來(lái)源的進(jìn)口胎牛血清(GIBCO,貨號(hào) 10091148)+4mM L-G(L-谷氨酰胺)+1mM (丙酮酸鈉)+1%雙抗】
2、培養(yǎng)環(huán)境:37℃、5%CO2
3、傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上時(shí),可以進(jìn)行傳代,傳代比例 1:2~1:4,2~3 天傳代一次。
(1)用巴氏滴管吸出細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基;
(2)加入 1ml 的 PBS,輕輕晃動(dòng)潤(rùn)洗細(xì)胞,然后將 PBS 吸出;
(3)加入 2ml 的胰酶,輕輕晃動(dòng)浸潤(rùn)細(xì)胞,然后放在培養(yǎng)箱內(nèi)消化消化 1~2 分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間);
(4)在顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞便開(kāi)始脫落,這時(shí)可以終止消化;
(5)加入 4ml 含血清的完全培養(yǎng)基,用移液器吹打細(xì)胞,使細(xì)胞脫落并形成單細(xì)胞懸液;
(6)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到 15ml 的離心管,1000rpm 離心 5min;
(7)離心完成后吸出上清丟棄,再用移液管取 10ml 完全培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,輕輕吹打混勻;
(8)將細(xì)胞懸液分裝到兩個(gè)新的 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,放在 37℃的 CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
4、細(xì)胞凍存:使用本公司無(wú)血清凍存液可直接將細(xì)胞凍存在-80℃(無(wú)需使用程序降溫盒),細(xì)胞在-80℃可保存 3 年,長(zhǎng)期保存建議使用液氮罐。
5、冷凍復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 4-6mL 完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6cm 皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

三、質(zhì)量檢測(cè)
1、STR 鑒定:正確
2、細(xì)菌檢測(cè):陰性
3、支原體檢測(cè):陰性

四、售后服務(wù)
1、收到細(xì)胞后請(qǐng)及時(shí)查看瓶身有無(wú)破損,是否漏液等現(xiàn)象;
2、用 75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶之后,放在培養(yǎng)箱中靜置 2-4 小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄,40 倍和 100 倍照片各一張(細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正?,F(xiàn)象);
3、原瓶中的培養(yǎng)基在細(xì)胞傳代之后不建議繼續(xù)使用,請(qǐng)配制新的完全培養(yǎng)基或者購(gòu)買(mǎi)本公司的專(zhuān)用培養(yǎng)基;
4、建議定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照記錄;收到細(xì)胞后 7 天內(nèi),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)有任何問(wèn)題,可申請(qǐng)售后。
5、強(qiáng)烈建議:在第一次細(xì)胞傳代時(shí),使用本公司配置的細(xì)胞培養(yǎng)瓶將細(xì)胞按照 1:2 進(jìn)行傳代,可以對(duì)比測(cè)試自配的培養(yǎng)基是否可以養(yǎng)好細(xì)胞。如果有以上任何問(wèn)題,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系本公司。

五、注意事項(xiàng)
1、本產(chǎn)品僅限于科研用途,若用于臨床診斷、治療等其它用途,本公司概不負(fù)責(zé)!
2、若使用本產(chǎn)品發(fā)表科學(xué)論文,請(qǐng)標(biāo)注:PC14B 由北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司(biobw)提供。

北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司的微生物菌種查詢(xún)網(wǎng)提供微生物菌種保藏、測(cè)序、購(gòu)買(mǎi)等服務(wù),是中國(guó)微生物菌種保藏中心的服務(wù)平臺(tái),并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢(xún)類(lèi)網(wǎng)站,自設(shè)設(shè)備及技術(shù)的微生物菌種保藏中心!歡迎廣大客戶(hù)來(lái)詢(xún)!

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