SNU-387細胞(人肝癌細胞)
細胞特性：
該細胞系來自41歲亞洲女性。Southern blot可檢測到乙型肝炎病毒(HBV)DNA，不表達乙肝病毒基因組RNA，需在2級生物安全防護下操作，在裸鼠中可成瘤。
1）形態(tài)：上皮型，貼壁生長
2）規(guī)格：1x106個/T25方瓶
3）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
細胞接受后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）將T25方瓶中的完全培養(yǎng)液回收至2個50mL離心管中后續(xù)培養(yǎng)此細胞繼續(xù)使用。（備注：先使用瓶子中完全培養(yǎng)液培養(yǎng)及盡快凍存保種細胞，保存種子后再嘗試自己完全培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察是否適合此細胞生長，以免使用自己培養(yǎng)液不適合細胞生長造成細胞狀態(tài)不好或死亡）。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
細胞用途：僅供科研使用。
本公司的細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）完全培養(yǎng)液：RPMI-1640+10%FBS++1%P/S
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：70%RPMI-1640，20%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS充分清洗細胞2-3次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入5ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入10mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.每5ml細胞懸液分裝到1個T25方瓶中進行培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，最后用70%RPMI-1640，20%FBS，10%DMSO凍存液重懸細胞沉淀，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
