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MonoMac6 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞
    MonoMac6 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞
  • 平臺編號:bio-131407
  • 細(xì)胞信息: MonoMac6 /MONO-MAC-6
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:STR鑒定正確
  • 服務(wù)費(fèi)用:
    加載中……
  • 訂購
  • 注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

  細(xì)胞介紹

  建立外周血的64歲的老人與復(fù)發(fā)急性單核細(xì)胞的白血病(AML外事局M5)在1985年后骨髓化生;攜帶t(9。11)(第22位;q23處)導(dǎo)致KMT2A-MLLT3(MLL-MLLT3;MLL-AF9)融合基因。

  更多的信息在這個細(xì)胞株在以下網(wǎng)站:“www.monocytes.de”;妹妹細(xì)胞系MONO-MAC-1(DSM ACC 252);細(xì)胞用于檢測致熱源。

  細(xì)胞特性

  1)來源:急性單核細(xì)胞白血病,單核細(xì)胞

  2)形態(tài):圓形,懸浮生長

  3)含量:1x106細(xì)胞數(shù)

  4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

  5)用途:僅供科研使用。

  運(yùn)輸和保存

  干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

 ?。?)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

  (2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

  細(xì)胞接收后的處理

  1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

  2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

  3)懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。

  4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。

  一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

  1)準(zhǔn)備RPMI 1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基 87%

  優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%

  P/S青霉素-鏈霉素   1%

  MEM NEAA非必需氨基酸 1%

  Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%

  牛胰島素 10μg/ml

  備注:該細(xì)胞對胎牛血清品質(zhì)比較敏感,需要用到優(yōu)質(zhì)胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞生長出現(xiàn)緩慢時,建議提高血清濃度到20%,或者更換更優(yōu)質(zhì)的胎牛血清來培養(yǎng)。

  2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  二.細(xì)胞處理:

  1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

  將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

  2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

  對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

  懸浮狀態(tài)下生長的細(xì)胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加完全培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長狀態(tài),一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個/mL(不同細(xì)胞對密度要求不同,)可以維持細(xì)胞的正常生長。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

  3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

  下面T25瓶為例;

  1.細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細(xì)胞/ml.

  2.1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

  3.將要凍存的細(xì)胞置于程序

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