HISMC 人腸平滑肌細(xì)胞 腸 人 貼壁 1ml/T25
HISMC人腸平滑肌細(xì)胞 可以提供 來(lái)源sciencell 進(jìn)種后做過(guò) 永生化處理過(guò) 培養(yǎng)基 SMCM
這個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)速度偏慢偏難養(yǎng)， 只提供1代凍存細(xì)胞，干冰運(yùn)輸，買一送一，發(fā)2支凍存細(xì)胞 款到后1-2個(gè)工作日左右發(fā)貨
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):
1.所發(fā)凍存細(xì)胞為2支(先復(fù)蘇一支，另一支液氮罐保存)
2.細(xì)胞復(fù)蘇若不順利，請(qǐng)您及時(shí)拍照反饋，以便盡快排除原因，成功完成復(fù)蘇
3.隨細(xì)胞有一管復(fù)蘇液，可以直接用于細(xì)胞復(fù)蘇，無(wú)需額外添加
4.細(xì)胞貼壁后可用您自己的完全培養(yǎng)基進(jìn)行換液(懸浮細(xì)胞半量換液，貼壁細(xì)胞則全換)
5.您自己配置的完全培養(yǎng)基請(qǐng)?zhí)砑?1%雙抗，降低細(xì)胞被污染的可能性
6.建議一支細(xì)胞復(fù)蘇到1個(gè)6孔板中的一個(gè)孔。盡早逐批凍存留種，以備后用
7.請(qǐng)仔細(xì)查看隨細(xì)胞一起寄出的說(shuō)明書
復(fù)蘇操作步驟:
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
1.將水浴鍋預(yù)熱至 37℃
2.用 75%酒精擦拭紫外線照射 30min 的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等
迅速解凍:
1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動(dòng)，使管中的液體迅速融化，時(shí)間控制在1分鐘左右
離心去除凍存液:
1.融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中，200xg離心 5-10min
2.吸棄上清液。
3.用復(fù)蘇液重懸細(xì)胞，吹打制成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度以5×10?/ml為宜。
4.將復(fù)蘇好的細(xì)胞懸液分裝入6孔板，將培養(yǎng)瓶放入 37℃和5%C02 的培養(yǎng)箱內(nèi)，8-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時(shí)間由細(xì)胞生長(zhǎng)情況而定
細(xì)胞生長(zhǎng)速度本身不是很快，對(duì)于細(xì)胞密度的依賴性比較明顯，前期建議1；2同等比例傳代，收到細(xì)胞的前期除了用SMCM培養(yǎng)基同時(shí)可以額外添加5%胎牛血清培養(yǎng)，可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，這個(gè)細(xì)胞本身不難消化，建議用胰酶替代物TrypLE Express消化細(xì)胞，可以有效降低胰酶對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的損傷影響
