細胞介紹
源自人肺腺癌,該肺組織仍處于分化狀態(tài)。PC-9(以前稱為PC-14)。PC-14 最初于1989 年作為源自人肺腺癌(未分化型)的細胞系存放在RIKEN生物資源中心。該生物資源中心通過短串聯(lián)重復序列 (STR) DNA 分析發(fā)現(xiàn)該細胞系與 PC-9 相同,PC-9 是源自人肺腺癌(分化型)的細胞系。此錯誤識別發(fā)生在細胞系存放在 RIKEN 生物資源中心之前。細胞系的名稱更改為 PC-9,以反映這一發(fā)現(xiàn)。該細胞吉非替尼耐藥。
細胞特性
1) 來源:人,肺腺癌組織
2) 形態(tài):圓形和紡錘形混合,多數(shù)貼壁少量懸浮,
3) 含量:>1x106 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)半貼細胞和貼壁不牢(懸?。┘毎篢25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備
1)準備DMEM 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;0.5ug/ml 吉非替尼;雙抗,1%。
注:上皮樣細胞,多數(shù)貼壁,圓形細胞和梭形細胞同時存在。傳代凍存時請收集圓形懸浮細胞。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。