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MUG-Chor1 是一種間充質(zhì)樣細(xì)胞系，于 2009 年從一名 57 歲白人女性脊索瘤患者的骶骨中分離出來(lái)。脊索瘤是一種罕見(jiàn)的生長(zhǎng)緩慢的腫瘤類型，MUG-Chor1 是一種生長(zhǎng)相對(duì)緩慢的細(xì)胞系。MUG-Chor1 具有異質(zhì)形態(tài)，由漿液細(xì)胞和粘液性細(xì)胞間質(zhì)組成，代表典型的脊索瘤特征。這些細(xì)胞含有轉(zhuǎn)錄因子 T (Brachyury) 的擴(kuò)增（脊索瘤最特異的標(biāo)記）以及 PTEN 的缺失。

細(xì)胞特性

1） 來(lái)源： 57 歲白人女性脊索瘤患者的骶骨

2） 形態(tài)：間充質(zhì)樣（長(zhǎng)梭形 不規(guī)則形狀）貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1x106  細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

 

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

1） 準(zhǔn)備IMDM加RPMI-1640(4:1) 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%； 1 % L-谷氨酰胺; 雙抗，1%。

注意：

1、將大鼠尾 I 型膠原蛋白（BD Biosciences，目錄號(hào) 354236）稀釋至 50 μg/ml。將 2-3 ml 包被緩沖液加入燒瓶中，并在室溫下孵育一小時(shí)或者使用細(xì)胞包被工作液（推薦iCell-8280）。小心吸出剩余溶液。使用 1x DPBS 沖洗燒瓶 2 次以去除酸。涂層燒瓶可立即使用，或在無(wú)菌條件下于 2-8 ℃保存長(zhǎng)達(dá)一周。

2、該細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢。倍增時(shí)間1周多，發(fā)貨估計(jì)3-4周 左右。  

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。