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bEnd.5(小鼠Balb / c腦內(nèi)皮瘤)
    bEnd.5(小鼠Balb / c腦內(nèi)皮瘤)
  • 平臺編號:bio-133211
  • 細(xì)胞信息: bEnd.5
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:/
  • 服務(wù)費用:
    加載中……
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  • 注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

bEnd.5(小鼠Balb / c腦內(nèi)皮瘤)
產(chǎn)品類別:人源細(xì)胞系
生長特性:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):貼壁上皮細(xì)胞融合生長
凍存條件:DMEM+10%FBS+1%非必需氨基酸(NEAA)+1mM丙酮酸鈉(NaP)
 
細(xì)胞系名稱:bEnd.5
種類:小家鼠,小鼠
背景:bEnd.5(小鼠Balb / c腦內(nèi)皮瘤)用BALB/c小鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞建立了b.End5細(xì)胞系。用編碼多瘤病毒中間T抗原的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染原代細(xì)胞進(jìn)行永生化。b、 流式細(xì)胞儀檢測End5細(xì)胞內(nèi)皮特異性蛋白(PECAM-1、Endoglin、MECA-32、Flk-1)陽性。炎性細(xì)胞因子誘導(dǎo)CAM-1、VCAM-1和E-選擇素等蛋白的表達(dá)。注射到小鼠體內(nèi)會導(dǎo)致血管瘤的發(fā)生。
組織:大腦
生長方式:粘著
參考文獻(xiàn):Cell 1989;57:1053;Semin Cancer Biol 1994;5:137,Int Immunol 1997;9:435
培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS+1%非必需氨基酸(NEAA)+1mM丙酮酸鈉(NaP)
我們強(qiáng)烈建議購買完全的培養(yǎng)基。
細(xì)胞收到后處理:
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運輸?shù)淖詈棉k法。收到細(xì)胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)

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