-
平臺編號：bio-133211
-
細胞信息： bEnd.5
-
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
-
用途：/
-
服務費用：
加載中…… - 訂購
-
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）
bEnd.5（小鼠Balb / c腦內皮瘤）
bEnd.5（小鼠Balb / c腦內皮瘤）
產(chǎn)品類別：人源細胞系
生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)：貼壁上皮細胞融合生長
凍存條件：DMEM+10%FBS+1%非必需氨基酸（NEAA）+1mM丙酮酸鈉（NaP）
細胞系名稱：bEnd.5
種類：小家鼠，小鼠
背景：bEnd.5（小鼠Balb / c腦內皮瘤）用BALB/c小鼠腦內皮細胞建立了b.End5細胞系。用編碼多瘤病毒中間T抗原的逆轉錄病毒感染原代細胞進行永生化。b、 流式細胞儀檢測End5細胞內皮特異性蛋白（PECAM-1、Endoglin、MECA-32、Flk-1）陽性。炎性細胞因子誘導CAM-1、VCAM-1和E-選擇素等蛋白的表達。注射到小鼠體內會導致血管瘤的發(fā)生。
組織：大腦
生長方式：粘著
參考文獻：Cell 1989；57:1053；Semin Cancer Biol 1994；5:137，Int Immunol 1997；9:435
培養(yǎng)基：DMEM+10%FBS+1%非必需氨基酸（NEAA）+1mM丙酮酸鈉（NaP）
我們強烈建議購買完全的培養(yǎng)基。
細胞收到后處理：
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）
細胞培養(yǎng)步驟：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）
產(chǎn)品類別：人源細胞系
生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)：貼壁上皮細胞融合生長
凍存條件：DMEM+10%FBS+1%非必需氨基酸（NEAA）+1mM丙酮酸鈉（NaP）
細胞系名稱：bEnd.5
種類：小家鼠，小鼠
背景：bEnd.5（小鼠Balb / c腦內皮瘤）用BALB/c小鼠腦內皮細胞建立了b.End5細胞系。用編碼多瘤病毒中間T抗原的逆轉錄病毒感染原代細胞進行永生化。b、 流式細胞儀檢測End5細胞內皮特異性蛋白（PECAM-1、Endoglin、MECA-32、Flk-1）陽性。炎性細胞因子誘導CAM-1、VCAM-1和E-選擇素等蛋白的表達。注射到小鼠體內會導致血管瘤的發(fā)生。
組織：大腦
生長方式：粘著
參考文獻：Cell 1989；57:1053；Semin Cancer Biol 1994；5:137，Int Immunol 1997；9:435
培養(yǎng)基：DMEM+10%FBS+1%非必需氨基酸（NEAA）+1mM丙酮酸鈉（NaP）
我們強烈建議購買完全的培養(yǎng)基。
細胞收到后處理：
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）
細胞培養(yǎng)步驟：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）
