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    人多發(fā)性骨髓瘤細胞
  • 平臺編號:bio-133408
  • 細胞信息: MOLP-8
  • 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
  • 用途:STR鑒定正確//
  • 服務費用:
    加載中……
  • 訂購 說明書
  • 注意事項:僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)

產(chǎn)品類別:人源細胞系
生長特性:懸浮
培養(yǎng)體系:1640+20%FBS
傳代方法:1:2傳代
細胞形態(tài):圓形
凍存條件:無血清細胞凍存液  
英文名稱  MOLP-8  
中文名稱  人多發(fā)性骨髓瘤細胞  
生長特性  圓形、懸浮  
凍存條件  無血清凍存液  
培養(yǎng)體系  1640+20%FBS  
傳代方法  1:2-1:3,第一次建議1:2傳代  
傳代情況  2~3天換液/傳代  
備注  用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng)  

二、細胞收到后處理  
收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100×,200×各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行售后的依據(jù)。  
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖詈棉k法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松)  
三、細胞培養(yǎng)步驟  
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。  
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。  
1、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:  
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。  
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。  
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。  
3)細胞凍存:  
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;  
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;  
3、用適量的凍存液重懸細胞,并放置于凍存管中;  
4、先將細胞凍存管放置于-20℃1.5h,然后將其移入-80℃。

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