一、細胞培養(yǎng)條件
產品名稱豬巨噬細胞
英文名稱ZMAC-4
生長特性貼壁生長
凍存條件無血清凍存液
培養(yǎng)體系DMEM+10%FBS
傳代方法
1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況2天換液
備注用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng)
T25 細胞到貨處理
觀察:
1 、收到細胞后,請及時核對培養(yǎng)瓶上標注的細胞名稱是否與訂購的細胞名稱一致以及培養(yǎng) 瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理:
1 、75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2 、顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存 (40x, 100x,200x 各一張) 前 三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。
3 、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀 態(tài)。
4 、收到細胞后,及時查看說明書是貼壁細胞還是懸浮細胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細胞 的傳代方法操作。
貼壁:未超過 80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留 5ml 完全培養(yǎng)基, 放入 37℃ 、5%CO2 孵箱培養(yǎng);超過 80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞 培養(yǎng)步驟。首次傳代,建議 1:2 傳代 (兩個 T25) 。(傳代時建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng) 基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進行對比培養(yǎng)。)
特殊細胞注意事項:個別細胞貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生細胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。 請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心 5min,收集上清 (后期對比培養(yǎng)使用), 沉淀加入胰酶 1-2ml ,輕輕吹打,重懸,消化 1-2 分鐘后,加 5ml 完全培養(yǎng)基終止反應。再 離心,棄上清,加 1-2ml 完全培養(yǎng)基重懸。然后按 1:2 比例進行分瓶傳代 (兩個 T25) ,補充 新的完全培養(yǎng)基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。