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產(chǎn)品編號：IM1141

產(chǎn)品類別：人源細胞系

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)體系：mDA維持培養(yǎng)基

細胞形態(tài)：胞體呈圓形、橢圓形、不規(guī)則形，具有長突起，呈現(xiàn)雙極或多極形態(tài)

背景資料：hPSC來源多巴胺神經(jīng)元是從人類多能干細胞（hPSC）分化得來，該細胞是分化早期的多巴胺神經(jīng)元，在維持培養(yǎng)基中培養(yǎng)時具有繼續(xù)向成熟多巴胺神經(jīng)元分化的能力。分化獲得的成熟多巴胺神經(jīng)元能表達特異性標志物（如TH, DAT，GIRK2等）。

培養(yǎng)基：mDA維持培養(yǎng)基（含mDA維持基礎(chǔ)培養(yǎng)基；mDA維持培養(yǎng)基補充劑 ，神經(jīng)元培養(yǎng)包被液）

該細胞免疫熒光鑒定正確，購買細胞免費送免疫熒光報告。

細胞培養(yǎng)步驟：

復(fù)蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL MNP維持培養(yǎng)基（含10μM IMC-014-Y）混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL MNP維持培養(yǎng)基（含10μM IMC-014-Y）后混勻。然后將所有細胞懸液加入含適量MNP維持培養(yǎng)基（含10μM IMC-014-Y）的基質(zhì)膠包被的六孔板（1孔）或35mm皿中培養(yǎng)過夜。24h后，換成不含IMC-014-Y的MNP維持培養(yǎng)基，視培養(yǎng)基顏色或隔2天換液。

細胞傳代：（可按培養(yǎng)器皿底面積 1:6 比例接種傳代）：細胞傳代（可按培養(yǎng)器皿底面積1:6比例接種傳代）：

 

1、棄去培養(yǎng)基，每孔加入1mL Accutase（含10μM IMC-014-Y），置于37℃培養(yǎng)箱消化4-5min。

 

2、4-5 min后每孔加入等量 MNP維持培養(yǎng)基（含10μM IMC-014-Y），輕輕吹打細胞，使細胞解離成單細胞。

 

3、將細胞懸液收集到15 mL離心管中，室溫下300 g離心5 min。

 

4、仔細抽吸上清液，不干擾細胞，用1mL恢復(fù)室溫的MNP維持培養(yǎng)基重懸細胞（含10μM IMC-014-Y），輕輕地上下移液以確保細胞溶液均勻。

 

5、使用MNP維持培養(yǎng)基（含10μM IMC-014-Y）稀釋細胞，將細胞以1:6比例接種到基質(zhì)膠包被的六孔板或35mm皿中培養(yǎng)過夜（按底面積算，1個T25相當(dāng)于六孔板2.5個孔，六孔板1孔可傳12孔板的2孔，24孔板的4孔，96孔板的6孔）。24h后，換成不含IMC-014-Y的MNP維持培養(yǎng)基，視培養(yǎng)基顏色或隔2天換液。

培養(yǎng)注意事項

 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

 

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

 

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

 

4. 客戶可購買MNP維持培養(yǎng)基（含MNP維持基礎(chǔ)培養(yǎng)基 ；MNP維持培養(yǎng)基補充劑A（200×） ；MNP維持培養(yǎng)基補充劑B（50×）

 

5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

 

6.該細胞僅供科研使用。