亚日韩在线中文字幕亚洲,国产在线播放鲁啊鲁视频,张柏芝手扒性器全部图片,亚洲成无码电影在线观看

 

據(jù)報(bào)道來自不同個(gè)體的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株U-118 MG (HTB-15) 和 U-138 MG (HTB-16)有著一致的VNTR和相近的STR模式。U-118 MG 和 U-138 MG細(xì)胞遺傳學(xué)上很相似并有至少六個(gè)衍生標(biāo)記染色體。這是1966年至1969年間J. Ponten和同事從惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤中構(gòu)建的細(xì)胞株中的一株(其它包括ATCC HTB-14和 ATCC HTB-16 and ATCC HTB-17)。U-118MG-NLUC-puro有U-118MG細(xì)胞構(gòu)建而來的。

 

該細(xì)胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml，培養(yǎng)過程中建議使用0.5ug/ml puro維持。

 

細(xì)胞特性

 

1） 來源：腦

 

2） 形態(tài)：混合型，貼壁生長

 

3） 含量：>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

 

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

5)  用途：僅供科研使用。

 

運(yùn)輸和保存

 

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

 

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

 

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

 

細(xì)胞接收后的處理

 

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

 

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

 

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

 

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

 

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

 

1） 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；0.5ug/ml puro,雙抗，1%。

 

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

 

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

 

二． 細(xì)胞處理

 

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

 

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

 

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。