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　　細胞名稱：人呼吸道上皮細胞HREC

　　產(chǎn)品規(guī)格：T25培養(yǎng)瓶x1；1.5ml凍存管x2

　　細胞數(shù)量：1x10^6；1x10^6

　　保存溫度：37℃；-198℃

　　運輸方式：常溫保溫運輸；干冰運輸

　　安全等級：1

　　用途限制：僅供科研2類

　　培養(yǎng)體系：DMEM高糖培養(yǎng)基+20%FBS+1%三抗

　　培養(yǎng)溫度：37℃

　　二氧化碳濃度：5%

　　簡介：人呼吸道上皮細胞HREC取自女性供體，上皮樣，貼壁培養(yǎng)。

　　注釋：倍增時間64h

　　STR信息：/

　　參考文獻

　　1致病菌金黃色葡萄球菌及肺炎鏈球菌代謝產(chǎn)物及菌體成分對人呼吸道上皮細胞結(jié)構(gòu)與功能的影響張鑫;秦嘯峰;黃瓊;楊義然;杜曉楠中華臨床免疫和變態(tài)反應雜志2019-12-30期刊

　　2干擾素-λ1在人類鼻病毒感染后兒童呼吸道上皮細胞中的表達林小娟;鐘禮立;謝亞平;鄧中平中國當代兒科雜志2019-12-18 16:51期刊

　　3鼻竇CT測量在呼吸道上皮腺瘤樣錯構(gòu)瘤術(shù)前診斷中應用周亞美;楊昕;劉文惠;王鴻麗;郝微微臨床軍醫(yī)雜志2019-12-15期刊

　　4基于人呼吸道上皮細胞模型的矽塵毒性機制研究陳尚雅;栗子淵;楊旭;牟英文;李超2019全國呼吸毒理與衛(wèi)生毒理學術(shù)研討會論文集2019-10-25中國會議

　　5基于人呼吸道上皮細胞模型的矽塵毒性機制研究陳尚雅;栗子淵;楊旭;牟英文;杜忠君中國毒理學會第九次全國毒理學大會論文集2019-09-17中國會議

　　驗收細胞注意事項

　　1、收到人呼吸道上皮細胞HREC細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。

　　2、收到人呼吸道上皮細胞HREC細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

　　3、收到人呼吸道上皮細胞HREC細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。

　　4、收到人呼吸道上皮細胞HREC細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

　　5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

　　6、24小時后，細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

　　7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

　　特別提醒：原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。