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　　細(xì)胞名稱(chēng)：人呼吸道上皮細(xì)胞HREC

　　產(chǎn)品規(guī)格：T25培養(yǎng)瓶x1；1.5ml凍存管x2

　　細(xì)胞數(shù)量：1x10^6；1x10^6

　　保存溫度：37℃；-198℃

　　運(yùn)輸方式：常溫保溫運(yùn)輸；干冰運(yùn)輸

　　安全等級(jí)：1

　　用途限制：僅供科研2類(lèi)

　　培養(yǎng)體系：DMEM高糖培養(yǎng)基+20%FBS+1%三抗

　　培養(yǎng)溫度：37℃

　　二氧化碳濃度：5%

　　簡(jiǎn)介：人呼吸道上皮細(xì)胞HREC取自女性供體，上皮樣，貼壁培養(yǎng)。

　　注釋?zhuān)罕对鰰r(shí)間64h

　　STR信息：/

　　參考文獻(xiàn)

　　1致病菌金黃色葡萄球菌及肺炎鏈球菌代謝產(chǎn)物及菌體成分對(duì)人呼吸道上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的影響張?chǎng)?秦嘯峰;黃瓊;楊義然;杜曉楠中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志2019-12-30期刊

　　2干擾素-λ1在人類(lèi)鼻病毒感染后兒童呼吸道上皮細(xì)胞中的表達(dá)林小娟;鐘禮立;謝亞平;鄧中平中國(guó)當(dāng)代兒科雜志2019-12-18 16:51期刊

　　3鼻竇CT測(cè)量在呼吸道上皮腺瘤樣錯(cuò)構(gòu)瘤術(shù)前診斷中應(yīng)用周亞美;楊昕;劉文惠;王鴻麗;郝微微臨床軍醫(yī)雜志2019-12-15期刊

　　4基于人呼吸道上皮細(xì)胞模型的矽塵毒性機(jī)制研究陳尚雅;栗子淵;楊旭;牟英文;李超2019全國(guó)呼吸毒理與衛(wèi)生毒理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集2019-10-25中國(guó)會(huì)議

　　5基于人呼吸道上皮細(xì)胞模型的矽塵毒性機(jī)制研究陳尚雅;栗子淵;楊旭;牟英文;杜忠君中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第九次全國(guó)毒理學(xué)大會(huì)論文集2019-09-17中國(guó)會(huì)議

　　驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)

　　1、收到人呼吸道上皮細(xì)胞HREC細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

　　2、收到人呼吸道上皮細(xì)胞HREC細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

　　3、收到人呼吸道上皮細(xì)胞HREC細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。

　　4、收到人呼吸道上皮細(xì)胞HREC細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

　　5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。

　　6、24小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過(guò)5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

　　7、貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

　　特別提醒：原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。