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小鼠成纖維細胞細胞名稱 PA317(小鼠成纖維細胞)
種屬 小鼠
年齡(性別) 胚胎
組織來源 胚胎
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
背景描述 PA317細胞源自TK-NIH/3T3細胞,通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞,結果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因導入人類,可能因為用于構建PA317細胞而轉入的DNA丟失,能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇,可以選出保留了包裝功能的細胞。選擇后,PA317細胞應在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天,以稀釋殘留的氨甲喋呤,此后PA317細胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個月。
生長培養(yǎng)基 DMEM高糖+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃