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培養(yǎng)條件：原代細胞取組織現(xiàn)分

4.細胞簡介：
人大隱靜脈平滑肌細胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側緣伴隱神經(jīng)上行，經(jīng)股骨內(nèi)側髁后方，進入大腿內(nèi)側部，與股內(nèi)側皮神經(jīng)伴行，逐漸向前上，在恥骨結節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、陰部外靜脈、股內(nèi)側淺靜脈和股外側淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時，須分別結扎、切斷各屬支，以防復發(fā)。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能：①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素；②參與血管壁的炎癥反應，并與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。因此，研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
5.方法簡介：
實驗室分離的人大隱靜脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：
實驗室分離的人大隱靜脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 
換液頻率 每2-3天換液一次 
生長特性 貼壁 
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 
消化液 0.25%胰蛋白酶 
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 
人大隱靜脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。