培養(yǎng)條件:原代細胞取組織現(xiàn)分
細胞簡介:
小鼠腎動脈平滑肌細胞分離自腎動脈組織;腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,最后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng):腎小球毛細血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
5.方法簡介:
實驗室分離的小鼠腎動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠腎動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠腎動脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
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