別稱 | pET22b |
啟動子 | T7 |
復制子 | pBR322 |
終止子 | T7 terminator |
質粒分類 | 大腸系列質粒;大腸表達質粒;pET系列質粒 |
質粒大小 | 5493bp |
質粒標簽 | N-pelB,C-6×His |
原核抗性 | Amp |
克隆菌株 | DH5a |
培養(yǎng)條件 | 37℃,有氧,LB |
表達宿主 | 大腸桿菌BL21(DE3) |
誘導方式 | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測序引物 | T7(TAATACGACTCACTATAGGG) |
3'測序引物 | T7-ter(TGCTAGTTATTGCTCAGCGG) |
載體宿主 | 大腸桿菌 |
載體用途 | 蛋白表達,分泌表達 |
基因種屬 | 空載體 |
基因類型 | ORF |
原核抗性 | Amp |
質粒簡介 | pET-22b質粒是一種原核表達載體,N端含有一個pelB前導肽、C-端的His標簽。該質粒含有多個常用的酶切位點,便于不同基因克隆。表達由宿主細胞提供的T7 RNA聚合酶誘導,目的基因被克隆到質粒載體上,受噬菌體強轉錄及翻譯信號控制。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區(qū)域在質粒圖譜中也被標注了出來。質粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列的作用下終止蛋白翻譯。 pET系統(tǒng)是有史以來在大腸桿菌中表達重組蛋白的功能最強大的系統(tǒng),也是現(xiàn)今原核表達方面使用最廣泛的系統(tǒng)。該系列質粒能很容易的通過降低誘導物的濃度來削弱蛋白表達。在非誘導條件下,可以使目的基因處于完全沉默狀態(tài)而不轉錄。 |