來源DSM 4623宿主DSM613推薦宿主(bio-120821平臺編號)
宿主培養(yǎng):37℃,好氧,營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,18-24h。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaC5.09，瓊脂 20.0g(波體培養(yǎng)基不含),蒸餾水10L,pH70.121c,15min滅菌。噬菌培養(yǎng): ①宿主菌準備從平板上挑取宿主菌單菌落;溶解于 40-50mL 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,37℃,160-180rpm 振蕩培養(yǎng)至 OD600 為0.1-0.4;②打開凍干管:安全柜中打開，用酒精燈為燒質(zhì)部，后迅速滴上無菌水使之破裂,隨后用鑷子將其獻碎; ③溶解凍干粉:吸取 0.5mL 營養(yǎng)肉湯打入凍干管,充分溶解后打入宿主菌液三角瓶; ④培養(yǎng):三角瓶置于37℃，搖床 160-180rpm 培養(yǎng)條件下培養(yǎng)過夜;G過濾:16-18h 后將噬菌體培養(yǎng)物以 4000g 離心 10 分鐘,用0.2 um 無菌過濾器過濾裂解物，濾波可在 4℃下保存。
