ATCC 7830萊氏曼氏乳桿菌單層凍干管打管說明！
小楊 / 2024-04-18 09:31:54
一、菌種簡介
規(guī)格：Freeze-Dried
拉丁屬名：Lactobacillus Leichmannii
用途：ATCC原裝進口
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）
二、詳細描述
Lactobacillus leichmannii (Henneberg) Bergey et al. 拉丁名
Strain Designations 菌株別名 313
Application 用途 Assay of vitamin B12 cobalamin, cobalamins Food testing Pharmaceutical and Personal Care
Biosafety Level 生物安全等級 1
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format 提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏條件
Frozen（冷凍物）: -80℃ or colder
Freeze-Dried（凍干物）: 2℃ to 8℃
Live Culture（活物）: See Propagation Section
Preceptrol? no
Type Strain 模式菌株 no
Comments 注釋 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis is a heterotypic synony
Medium 培養(yǎng)基 ATCC? Medium 416: Lactobacilli MRS Agar/Broth
Growth Conditions 生長條件
Temperature 培養(yǎng)溫度: 37℃
Atmosphere 需氧情況: 5% CO2
Name of Depositor 寄存人 RP Tittsler
References 參考文獻 AOAC International Vitamin assays, microbiological method. Gaithersburg, MD:AOAC International;AOAC "Official Methods of Analysis of the AOAC International" 960.46. AOAC International Cobalamin (vitamin B12 activity) in milk-based infant formula, turbidimetric method. Gaithersburg,
MD:AOAC International;AOAC "Official Methods of Analysis of the AOAC International" 986.23. Hoffmann CE, et al. Response of Lactobacillus leichmannii 313 to the antipernicious anemia factor. J. Biol. Chem. 176: 1465-1466, 1948.
Dietary Supplements: Oil-and Water-Soluble Vitamins with Minerals Tablets. Rockville, MD: U.S. Pharmacopeia; USP USP34-NF29, 2011
Cross References Nucleotide (GenBank) : AF496040 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis hypothetical protein gene, partial cds.
三、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
四、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應在 2-8°C 保存。西林瓶菌種請置于-20°C 保存。
五、注意事項
1) 首次活化，用盡量少的復水液溶解，接種在 5ml 的液體培養(yǎng)基中，靜止培養(yǎng)，如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；二次接種量要多，固體斜面培養(yǎng)基水分要少才能讓菌體長得比較明顯，液體培養(yǎng)要靜止培養(yǎng)；
2）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；
3）菌種操作應在無菌條件下進行；轉種完畢，應經滅菌再做丟棄處理；
4）應根據菌種狀況及時轉接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
5）菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降，應及時和
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六、單層安瓿瓶凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在 4-10℃的環(huán)境下，某些菌種經過冷凍干燥并抽真空保存的，開啟后必須一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作為保護劑，里面菌體為少數，復蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復蘇不成功；
3、凍干菌種經過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，有時延滯期較長，如在說明書建議的培養(yǎng)時間還未長起來，請繼續(xù)在相應的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間，直至菌種培養(yǎng)完成；有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長，一般來說菌種穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
4、暫不啟開的安瓿管應于 4℃中保藏（特殊除外）。
5、凍干管打開后需一次用完，不能留存。
6、打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛。
微生物菌種查詢網作為中國微生物菌種中心引航者，單位代為引進美國ATCC微生物菌種保藏中心，德國DSMZ菌種保藏中心，荷蘭CBS菌種保藏中心，日本JCM微生物菌種保藏中心，包括其中的ATCC微生物細菌與噬菌體（18382）；細胞系和雜交瘤（4997）；真菌和酵母（58183）；原代細胞（146）；原生動物和藻類（2428）；干細胞（102）；載體，克隆與分子（18006）；病毒（3594）；核酸 - DNA / RNA（1350），引進進口微生物菌種貨期短，質量保證，UPS國際快遞運輸。
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