大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞的應(yīng)用及制備方法！
小楊 / 2024-05-06 09:21:21
一、背景及概述
成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織中最常見而且數(shù)量較多的一種細(xì)胞，位于膠原纖維近旁并依附于其上。此細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)可隨其功能狀態(tài)的不同而改變。在功能活動旺盛時，成纖維細(xì)胞的胞體較大，呈扁平星形，有突起。胞核呈卵圓形，核染色質(zhì)較少，著色淺，核仁明顯。胞質(zhì)較多，弱鹼性，內(nèi)含豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核蛋白體、高爾基復(fù)合體以及微絲和微管等結(jié)構(gòu)，表明此種細(xì)胞具有合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和多糖蛋白，形成膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維和基質(zhì)的作用。
在相對靜止或功能活動不活躍時的細(xì)胞，稱為纖維細(xì)胞。這種細(xì)胞比成纖維細(xì)胞小，輪廓不甚清楚，多呈梭形。胞質(zhì)少，弱嗜酸性，其中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體及其它細(xì)胞器均不發(fā)達(dá)。這表明纖維細(xì)胞是功能活動不活躍的細(xì)胞。但在一定條件下，如創(chuàng)傷修復(fù)，結(jié)締組織再生時，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞，積極參與合成和分泌蛋白質(zhì)，形成纖維和基質(zhì)。
二、應(yīng)用
大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞分離自正常大鼠肺動脈組織，呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。
大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞，均來自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
三、制備方法
有研究探究氯化鈷對于原代大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞（PAF）的增殖、遷移、表型轉(zhuǎn)化作用的影響。分離培養(yǎng)大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞，利用氯化鈷刺激PAF細(xì)胞，并通過MTT、細(xì)胞劃痕、Transwell、表型轉(zhuǎn)化標(biāo)志蛋白測定以及PI3K/Akt信號通路蛋白的變化研究氯化鈷對PAF的影響。
結(jié)果：MTT結(jié)果顯示，與對照組相比，氯化鈷可以抑制大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞的增殖活性（P<0.001），并呈濃度依賴性。劃痕實驗及Transwell實驗提示較高氯化鈷(200μmol·L-1)處理PAF細(xì)胞后可以抑制細(xì)胞遷移。隨濃度增加，氯化鈷可以抑制PAF的P110α、p-Akt蛋白表達(dá)。
結(jié)論：氯化鈷對于體外培養(yǎng)的原代大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞的增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)化特性有一定的抑制作用，這可能與氯化鈷抑制PI3K/Akt信號通路的表達(dá)有關(guān)。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司的
微生物菌種查詢網(wǎng)提供微生物菌種保藏、測序、購買等服務(wù),是中國微生物菌種保藏中心的服務(wù)平臺，并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢類網(wǎng)站，自設(shè)設(shè)備及技術(shù)的微生物菌種保藏中心！歡迎廣大客戶來詢！
下載附件
上一篇：ATCC 35149 嗜肺巴氏桿菌 百歐博偉生物
下一篇：柯氏動彎桿菌的實驗內(nèi)容與操作步驟及注意事項！