小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞的質(zhì)量檢測與使用方法!
小楊 / 2024-05-09 08:50:19
一、產(chǎn)品信息
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:原代細(xì)胞
組織來源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
用途:研究
注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))
二、細(xì)胞簡介
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。本公司生產(chǎn)的
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞采用分離骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
三、方法簡介
分離的
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞采用分離骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化法 制備而來,細(xì)胞總量約為5×105 cells/瓶。
四、質(zhì)量檢測
分離的
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
五、培養(yǎng)信息
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
傳代比例 不傳代
利多卡因(12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
六、使用方法
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈巨噬細(xì)胞樣,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群;建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗??蛻羰盏郊?xì)胞后,請按照以下方法進行操作。
1、取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2、特殊細(xì)胞消化一
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加利多卡因(12mM)消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,37℃溫浴3min(不能超過5min);倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基稀釋消化液;
3)用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,吸出細(xì)胞懸液,經(jīng)1200rpm離心5min,丟棄上清;
4)用完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計數(shù)接種于相應(yīng)實驗器具內(nèi),待細(xì)胞完全貼壁后開始試驗(預(yù)計2h貼壁,12-24h完全展開)。
5)待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3、特殊細(xì)胞消化二
1)若細(xì)胞無法消化,更換消化液為0.25%胰蛋白酶,按照上述消化一方案操作。
2)若仍然無法消化,加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化,采用無菌細(xì)胞刮,直接刮取細(xì)胞(此法不推薦,最后選擇,會造成細(xì)胞機械損傷死亡)。
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