金黃色鏈霉菌的形態(tài)特征與培養(yǎng)方法及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容！
小楊 / 2024-06-14 09:24:56
金黃色鏈霉菌是Streptomyces屬的微生物，原產(chǎn)地為中國(guó)。主要用途為分類(lèi)；研究。
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Streptomyces Aureusensis
拉丁名稱(chēng)：Streptomyces aureusensis
模式菌株：是
來(lái)源歷史：←湖南科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
收藏時(shí)間：2018/6/22
原始編號(hào)：ZFG47
原產(chǎn)國(guó)：中國(guó)
特征特性：在高氏一號(hào)培養(yǎng)基上經(jīng)過(guò)21d，28℃的培養(yǎng)后形成菌落，氣生菌絲極少，基內(nèi)菌絲為金黃色，無(wú)可擴(kuò)散性色素；孢子卵圓形，表面帶刺，螺旋?？稍?-45℃內(nèi)生長(zhǎng)（45℃不生長(zhǎng)）；在pH 5-10內(nèi)生長(zhǎng)；耐鹽度為0-10%(w/v)；酯酶分解Tween 20、Tween 40和Tween 80；水解淀粉，明膠不液化，牛奶胨化且凝固，硫化氫、黑色素、硝酸鹽實(shí)驗(yàn)均為陰性；以果糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露醇、葡萄糖。
生物危害程度：四類(lèi)
致病對(duì)象：無(wú)
分離基物：土壤
采集地：湖南省湘潭市
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：ISP-2培養(yǎng)基
酵母浸粉 4.0 g
麥芽浸粉 10.0 g
葡萄糖 4.0 g
瓊脂 15.0 g
蒸餾水 1000.0 mL
pH 7.3
以上成分121℃，滅菌15 min。液體培養(yǎng)基不加瓊脂。推薦使用商品化成品培養(yǎng)基。
培養(yǎng)溫度：28 ℃
需氧類(lèi)型：好氧
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、形態(tài)特征
在高氏一號(hào)培養(yǎng)基上經(jīng)過(guò)21d，28℃的培養(yǎng)后形成菌落，氣生菌絲極少，基內(nèi)菌絲為金黃色，無(wú)可擴(kuò)散性色素；孢子卵圓形，表面帶刺，螺旋?？稍?-45℃內(nèi)生長(zhǎng)（45℃不生長(zhǎng)）；在pH 5-10內(nèi)生長(zhǎng)；耐鹽度為0-10%(w/v)；酯酶分解Tween 20、Tween 40和Tween 80；水解淀粉，明膠不液化，牛奶胨化且凝固，硫化氫、黑色素、硝酸鹽實(shí)驗(yàn)均為陰性；以果糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露醇、葡萄糖、麥芽糖、淀粉、鼠李糖、棉子糖、海藻糖、蔗糖、甘油為碳源，可利用半胱氨酸、組氨酸、甲基丙氨酸、天冬氨酸、蘇氨酸、精氨酸、甲硫氨酸和纈氨酸為氮源；G+C%:70.94%，脂肪酸：C16:0iso 30.35% ，C16:0 15.35% ， C15:0anteiso 10.87%。細(xì)胞壁組分：糖組分xyl,man,glu,gal ，氨基酸組分：Ala,Glu,Gly,Asp,L,L-DAP。 序列接受號(hào)：MH300129（1395bp）。
三、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基編號(hào)：CM0006 MRS 培養(yǎng)基
2、培養(yǎng)基成分：酪蛋白胨 10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母粉 5.0g，葡萄糖 5.0g，乙酸鈉 5.0g，檸檬酸二銨 2.0g，Tween 80 1.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，MnSO4.H2O 0.05g，CaCO3 20.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH6.8。推薦使用商品化成品培養(yǎng)基。
3、需氧類(lèi)型：好氧
4、培養(yǎng)溫度：37℃
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4、過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
五、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間：細(xì)菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、試管斜面菌種請(qǐng)盡快轉(zhuǎn)接，不建議長(zhǎng)期存放。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)按照本說(shuō)明書(shū)推薦條件進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類(lèi)型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，我單位不負(fù)責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
六、凍干管打管說(shuō)明書(shū)
1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂（應(yīng)避免過(guò)多水蒸氣影響菌種的復(fù)蘇），用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml（建議勿超過(guò) 0.5ml）適宜的液體培養(yǎng)基(不添加瓊脂)，滴入管內(nèi)，輕輕振蕩，待安瓿管內(nèi)的菌體溶解呈懸浮狀，將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻，可將殘留在吸管中的 1-2 滴菌懸液轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)，以液體培養(yǎng)結(jié)果為準(zhǔn)。
3、凍干管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管內(nèi)大部分是用牛奶做保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功。
4、打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
5、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤(pán)上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
6、菌種復(fù)蘇時(shí)，請(qǐng)務(wù)必記錄好菌種的編號(hào)和制備批號(hào)，如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏骄姾?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理。
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