糠秕馬拉色菌糠秕孢子菌：主要用于生物醫(yī)學(xué)研究
小楊 / 2024-06-18 09:44:20
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Malassezia FurfurPityrosporum Orbiculare
拉丁文名：Malassezia furfur(Pityrosporum orbiculare)
其他編號(hào)：ATCC 44344
培養(yǎng)基編號(hào)：143
培養(yǎng)溫度：28-30
用途：生物醫(yī)學(xué)研究
相關(guān)的培養(yǎng)基詳細(xì)信息如下：
培養(yǎng)基編號(hào)：143
名稱：ATCC medium: 1072
糠秕孢子菌培養(yǎng)基 配方文檔：
可用于培養(yǎng)菌種：
備注：麥芽汁瓊脂 60.0 g
牛膽汁（干燥） 20.0 g
吐溫40 10.0 g
Glycerol mono-oleate 2.5 g
蒸餾水 1.0 L
用途：生物醫(yī)學(xué)研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
凍干菌種和試管斜面請(qǐng)置于2-8℃冷藏。西林瓶菌種請(qǐng)置于-20℃冷凍。
培養(yǎng)基1：
麥芽汁瓊脂60.0 g ；牛膽汁（干燥）20.0 g ；吐溫40 10.0 g；甘油單油酸脂 2.5 g； 蒸餾水 1L；PH自然。
培養(yǎng)基2：
Peptone 5.0g；Yeast extract 3.0g；Malt extract 3. 0g；Glucose 10.0g；
Olive oil 10.0g；Agar 20.0g；Distilled water 1. OL； Adjust pH to 6. 0
3、培養(yǎng)溫度：30℃
4、培養(yǎng)時(shí)間：24-48小時(shí)
1、凍干首次活化，干粉要全部用完，不能保留，用0.1-0.2ml的培養(yǎng)液或者無(wú)菌水溶解，接種在2支斜面上，因凍干菌處于休眠狀態(tài)，請(qǐng)勿接種多支斜面或平板，以免因接種量不足而導(dǎo)致復(fù)蘇不成功。
2、復(fù)蘇后，微生物菌種應(yīng)保藏于建議的溫度、清潔和干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)按照本說(shuō)明書(shū)推薦條件進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，本司不負(fù)責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
五、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
六、凍干管打管說(shuō)明書(shū)
1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂（應(yīng)避免過(guò)多水蒸氣影響菌種的復(fù)蘇），用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml（建議勿超過(guò) 0.5ml）適宜的液體培養(yǎng)基(不添加瓊脂)，滴入管內(nèi)，輕輕振蕩，待安瓿管內(nèi)的菌體溶解呈懸浮狀，在用無(wú)菌吸管吸取全部菌懸液接在 1-2 支建議的培養(yǎng)基試管中（不超過(guò) 2 支，單位所提供的培養(yǎng)基配方中有瓊脂，請(qǐng)務(wù)必做成試管斜面，配方中沒(méi)有瓊脂，試管中液體培養(yǎng)基不超過(guò) 5ml），并在建議的條件下靜止培養(yǎng)。
3、凍干管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管內(nèi)大部分是用牛奶做保護(hù)劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功。
4、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
5、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤(pán)上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
6、菌種復(fù)蘇時(shí)，請(qǐng)務(wù)必記錄好菌種的編號(hào)和制備批號(hào)，否則不予售后。
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