褐紅花褶傘的形態(tài)特征與培養(yǎng)方法及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容！
小楊 / 2024-07-04 09:39:56
褐紅花褶傘是Panaeolus屬的微生物，原產(chǎn)地為中國(guó)。主要用途為研究；教學(xué)。
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：培養(yǎng)物
拉丁屬名：Panaeolus Subbalteatus
拉丁屬名：Panaeolus
種名加詞：subbalteatus (Berk. & Broome) Sacc.
收藏時(shí)間*：2008-10-20
來(lái)源歷史：西北農(nóng)林科技大學(xué)轉(zhuǎn)
原產(chǎn)國(guó)：中國(guó)
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；教學(xué)
特征特性：子實(shí)體較小。菌蓋直徑2-4cm,鐘形到半球形，中央凸起，淺黃褐色，中部暗紅褐色。菌肉污白色。菌褶灰褐色，直生。菌柄長(zhǎng)6-8cm，粗0.3-0.5cm，淺紅褐色，上部有粉狀顆粒，直立，空心。孢子光滑，橢圓形，10-13μm×6-8μm。生于林地，有毒。
生物危害程度 四類(lèi)
致病對(duì)象：無(wú)
分離基物：菌體
采集地區(qū)：陜西
采集具體地點(diǎn)：鎮(zhèn)安木王國(guó)家森林公園針闊葉混交林
培養(yǎng)基信息：培養(yǎng)基編號(hào): 14 培養(yǎng)基名稱(chēng): PDA
培養(yǎng)溫度：25
資源保護(hù)類(lèi)型：培養(yǎng)物
保藏方法：定期移植法
共享方式：資源交換性共享
提供形式：斜面培養(yǎng)物
實(shí)物狀態(tài)：有實(shí)物
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、形態(tài)特征
褐紅花褶傘，子實(shí)體較小。菌蓋直徑2-4cm,鐘形到半球形，中央凸起，淺黃褐色，中部暗紅褐色。菌肉污白色。菌褶灰褐色，直生。菌柄長(zhǎng)6-8cm，粗0.3-0.5cm，淺紅褐色，上部有粉狀顆粒，直立，空心。孢子光滑，橢圓形，10-13μm×6-8μm。生于林地，有毒。
三、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱(chēng)種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類(lèi)孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類(lèi)的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2、干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3、高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4、過(guò)濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
五、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶請(qǐng)?jiān)?20°C 保存。
六、注意事項(xiàng)
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無(wú)菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過(guò) 2 支斜面或平板；若直接接種液體培養(yǎng)基，則試管液體以不超過(guò) 5ml 為宜）；經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢(xún)我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
3）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
6）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
7）打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8）西林瓶開(kāi)封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜內(nèi)使用尖嘴鉗去除塑料蓋及鋁蓋，注意不要同時(shí)打開(kāi)膠塞。緩慢開(kāi)啟膠塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用無(wú)菌吸管注入0.5ml 適宜的液體培養(yǎng)基復(fù)溶凍干粉末。
9）安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
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