食油假單胞菌：檢測抗菌防腐劑抗生物降解作用測試
小楊 / 2024-07-08 09:05:38
食油假單胞菌是Pseudomonas屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。主要用途為研究；生產(chǎn)，具體用途為與其它菌復(fù)配后用于驅(qū)油。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Pseudomonas Oleovorans
屬：Pseudomonas
原產(chǎn)地：中國
模式菌株：非模式菌株
培養(yǎng)基編號：2
培養(yǎng)溫度：25℃
用途：檢測抗菌防腐劑抗生物降解作用測試
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、形態(tài)特征
食油假單胞菌，G染色陰性，短桿， 0.40.6×1.22.0μm，極生鞭毛，氧化酶、接觸酶陽性，明膠液化、淀粉水解陽性，硝酸鹽水解陽性，反硝化陰性，41℃生長?？衫枚喾N底物產(chǎn)酸，在液蠟、豆油、菜籽油、色拉油等多種脂肪中可產(chǎn)大量糖脂表面活性劑。
三、培養(yǎng)方法
菌種經(jīng)人工傳代保藏過程中,由于自發(fā)突變而引起特性變?nèi)趸蛳鶠榫N衰退。使衰退的菌種重新恢復(fù)原來的優(yōu)良特性,稱為菌種復(fù)壯。常用方法有:
①分離純化：將菌種接種至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí),取菌液在營養(yǎng)瓊脂平板上分區(qū)劃線,培養(yǎng)后挑取典型單個(gè)菌落。產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
②宿主復(fù)壯：將退化菌種接種到相應(yīng)昆蟲或動(dòng)植物宿主體內(nèi),傳種數(shù)代可恢復(fù)其原有的特性與毒力。
四、操作流程
菌株復(fù)蘇:(按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇)
1)所有菌株,顯色培養(yǎng)基分4區(qū),每區(qū)一株,標(biāo)明菌株號、菌種名常用縮寫如下:
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌,其他菌種標(biāo)記全名。
2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h
菌種鑒定:(48h后觀察結(jié)果)
五、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶請?jiān)?20°C 保存。
六、注意事項(xiàng)
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支斜面或平板；若直接接種液體培養(yǎng)基，則試管液體以不超過 5ml 為宜）；經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長，這時(shí)需較長的培養(yǎng)時(shí)間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
3）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
5）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和
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6）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
7）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8）西林瓶開封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜內(nèi)使用尖嘴鉗去除塑料蓋及鋁蓋，注意不要同時(shí)打開膠塞。緩慢開啟膠塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用無菌吸管注入0.5ml 適宜的液體培養(yǎng)基復(fù)溶凍干粉末。
9）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
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