池生戴爾福特菌的形態(tài)特征與菌株培養(yǎng)及保存方法！
小楊 / 2024-09-14 09:02:03
池生戴爾福特菌是Delftia屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。主要用途為研究，具體用途為用于環(huán)境污水處理研究。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Delftia Lacustris
拉丁名稱：Delftia lacustris
模式菌株：否
來源歷史：←北京工商大學化工學院（10130）
收藏時間：2006-03-26
原始編號：P18
特征特性：G‾，菌體桿狀，成堆排列或鏈狀排列。有端生成束的鞭毛，運動。菌落圓形，表面光滑、無光澤、不透明。1，接觸酶和氧化酶陽性，不水解尿素、淀粉，明膠不液化。具有很強的1反硝化能力，生長適應性強。
參考用途：用于環(huán)境污水處理研究。
生物危害程度：四類
致病對象：無
分離基物：馴化活性污泥
采集地：北京工商大學
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：0002 營養(yǎng)肉湯瓊脂（Nutrient Agar）
蛋白胨 5.0 g
牛肉浸粉 3.0 g
NaCl 5.0 g
瓊脂 15.0 g
蒸餾水 1000.0 mL
pH 7.0
培養(yǎng)芽胞桿菌時加入5 mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽胞。以上成分121℃，滅菌15 min。液體培養(yǎng)基不添加瓊脂。推薦使用成品培養(yǎng)基。
培養(yǎng)溫度：28 ℃
需氧類型：好氧
用途：研究；用于環(huán)境污水處理研究。
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）
二、形態(tài)特征
池生戴爾福特菌，G‾，菌體桿狀，成堆排列或鏈狀排列。有端生成束的鞭毛，運動。菌落圓形，表面光滑、無光澤、不透明。好氧，接觸酶和氧化酶陽性，不水解尿素、淀粉，明膠不液化。具有很強的好氧反硝化能力，生長適應性強。
三、菌種的培養(yǎng)
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
四、使用范圍
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚,釀酒酵母菌組成成分精確,重復性強,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細菌。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎(chǔ)上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。
五、保存方法
1、傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
2、液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
3、懸液保存法：
①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
4、載體保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
5、常用的冷凍保存法：
①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③液氮保存法(-196℃):是適用范圍最廣的微生物保存法。
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