莫氏年輕泰坦桿菌：主要用于分析檢測和質(zhì)量控制
小楊 / 2024-10-24 09:10:49
莫氏年輕泰坦桿菌是Cronobacter屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。主要用途為研究，具體用途為分析檢測。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Cronobacter Muytjensii
拉丁名稱：Cronobacter muytjensii
模式菌株：否
來源歷史：←中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院食品安全研究所(10403.20) ←ATCC
收藏時間：2007/3/5
特征特性：G-桿菌，賴氨酸脫羧酶陰性，鳥氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶陽性，山梨醇、側(cè)金盞花醇、粘液酸均陰性，服-潑二氏實(shí)驗(yàn)陽性，吲哚實(shí)驗(yàn)〈±〉，尿素酶陰性，蔗糖、棉子糖、蜜二糖為陽性，產(chǎn)黃色素，兼性厭氧，最適pH7.4~7.6。
參考用途：研究、質(zhì)量控制
生物危害程度：四類
致病對象：無
用途：研究；分析檢測；研究、質(zhì)量控制
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、形態(tài)特征
NA培養(yǎng)基，36℃培養(yǎng)24h，菌落黃色，圓形，表面光滑、濕潤，不透明；菌體短桿狀，革蘭氏陰性，單個、成對排列，不產(chǎn)芽胞。沙門氏菌顯色培養(yǎng)基，36℃培養(yǎng)24h，菌落藍(lán)色，菌落周圍有紫色色素。
三、培養(yǎng)條件
1、營養(yǎng)肉汁瓊脂：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。
2、需氧類型：好氧
3、培養(yǎng)溫度：55℃
四、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
六、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時間：細(xì)菌1-2天，酵母3天，霉菌5-7天，大型真菌7-10天。
2、試管斜面種請盡快轉(zhuǎn)接，不建議長期存放。
3、初次使用時請按照本說明書推薦條件進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，我司不負(fù)責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全儲存和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
七、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
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