甘薯鏈霉菌的菌株外形與性質(zhì)及微生物菌種培養(yǎng)方法！
小楊 / 2024-11-15 08:57:49
甘薯鏈霉菌，孢子絲短，鉤、環(huán)狀至1—2圈螺旋形。孢子卵圓形、橢圓形，表面光滑或罕有小刺和褶皺。主要用于教學(xué)，研究。
一、菌種簡(jiǎn)介
提供形式：凍干物
拉丁屬名：Streptomyces Ipomoeae
拉丁學(xué)名：Streptomyces ipomoeae
原始編號(hào)：DSM 40383
菌株來(lái)源：←DSMZ
保藏人：劉志恒
直接來(lái)源國(guó)家：德國(guó)
保藏時(shí)間：10/12/1998
其他保藏編號(hào)：=
ATCC 25462 =CBS 695.69 =ISP 5383 =NBRC 13050
生物危害：四類(lèi)
模式菌株：模式菌株
菌株用途：模式菌株
培養(yǎng)溫度：28℃
培養(yǎng)基：0038
分離源：軟腐甘薯
用途：模式菌株
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、菌株外形
營(yíng)養(yǎng)瓊脂：基絲亮銀色。馬鈴薯塊：無(wú)氣絲?；z淺褐色。無(wú)可溶色素。明膠液化弱，無(wú)色素。牛奶不凝固、但胨化。淀粉12天完全水解。纖維素上不生長(zhǎng)。硝酸鹽還原。不產(chǎn)生類(lèi)黑色素、酪氨酸酶和H2S。利用D—葡萄糖、L—阿拉伯糖、D—木糖、D—果糖、蔗糖、鼠李糖、棉子糖、肌醇、D—甘露醇，有拮抗性。
三、菌株性質(zhì)
蔗糖硝酸鹽瓊脂：無(wú)氣絲?；z好，褶皺，橄欖黃色。淀粉瓊脂：氣絲白色，帶藍(lán)綠色斑片?；z平坦，象牙色。無(wú)可溶色素。甘油天冬素瓊脂(ISP)、無(wú)機(jī)鹽淀粉瓊脂 (ISP)、酵母精麥芽精瓊脂(ISP)、燕麥粉瓊脂(ISP)：氣絲藍(lán)色系列?；z反面在第一和第三種培養(yǎng)基上淡黃色或灰黃色，在其余兩種培養(yǎng)基上黃色加淡藍(lán)色或淡綠色，對(duì) pH不敏感?？赡苡雄E量黃色或綠色可溶色素。
四、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢(shì)種群;
5、本品安全高效、無(wú)抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對(duì)多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時(shí)使用。
五、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,是為科研和提供微生物菌種資源共享服務(wù)的專(zhuān)業(yè)平臺(tái)。
2、國(guó)內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時(shí)添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對(duì)不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法,保證菌種的復(fù)蘇質(zhì)量。
3、嚴(yán)格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類(lèi)產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評(píng)。
六、微生物菌種培養(yǎng)方法
1、孢子制備
⑴放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵產(chǎn)品僅限用于科研霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
2、種子制備
⑴搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
七、注意事項(xiàng)
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml-0.5ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無(wú)菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過(guò) 2 支平板，操作完畢后盡快置于厭氧環(huán)境下恒溫培養(yǎng)；若需接種液體培養(yǎng)基，制作培養(yǎng)液時(shí)，應(yīng)使用厭氧螺口試管，并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)液中的氧氣）；
2）經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間；若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和
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7）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏骄姾?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
8）打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
9）安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
10）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
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