香港戈登氏菌的優(yōu)勢特點(diǎn)與菌株培養(yǎng)及注意事項(xiàng)有哪些？
小楊 / 2024-12-20 09:02:44
香港戈登氏菌是Gordonia屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。與模式菌株Gordonia hongkongensis HKU50(T) LC072670相似度為99.12%。在2216E平板上28℃培養(yǎng)3天，菌落呈橙色，不透明，表面光滑，邊緣規(guī)則，無暈環(huán)，直徑0.1mm。主要用途為研究，具體用途為海岸帶細(xì)菌。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干粉
拉丁屬名：Gordonia Hongkongensis
拉丁名稱：Gordonia hongkongensis
模式菌株： 否
來源歷史：←浙江大學(xué)環(huán)境污染防治研究所
收藏時間：2022-09-19
原始編號：AC31
原產(chǎn)國：中國
特征特性：菌落淡桔色，表面粗糙；菌體桿狀，單個或成對排列。可在500 mg/L聯(lián)苯為唯一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基上生長。
參考用途：聯(lián)苯降解
生物危害程度：四類
致病對象：無
分離基物：土壤
采集地：河南省鄭州市
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：0033 LB培養(yǎng)基
蛋白胨 10.0 g
酵母浸粉 5.0 g
NaCl 10.0 g
瓊脂 15.0 g
蒸餾水 1000.0 mL
pH 7.0
以上成分121℃，滅菌15 min。液體培養(yǎng)基不加瓊脂。推薦使用成品培養(yǎng)基。
培養(yǎng)溫度：30 ℃
需氧類型：好氧
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢種群;
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時使用。
三、產(chǎn)品優(yōu)勢
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,是為科研和 提供微生物菌種資源共享服務(wù)的專業(yè)平臺。
2、國內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法,保證菌種的復(fù)蘇質(zhì)量。
3、嚴(yán)格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評
四、菌種培養(yǎng)
1、孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 產(chǎn)品僅限用于科研霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
2、種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
五、注意事項(xiàng)
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支平板或者斜面）；
2）經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時和
微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
7）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請?jiān)谑盏骄N后 2 個月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
8）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
9）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
10）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會逐漸下降。
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