動物細(xì)胞培養(yǎng)中血清的來源與種類及選擇與使用注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-02-25 14:44:16
動物細(xì)胞培養(yǎng)中,
血清提供營養(yǎng)、激素、生長因子等,促進(jìn)細(xì)胞生長。血清分多種類型和等級,選擇需考慮細(xì)胞需求、品質(zhì)批次。儲存應(yīng)低溫,使用前解凍搖勻。
動物細(xì)胞培養(yǎng)中,
血清是一種關(guān)鍵的培養(yǎng)輔助物質(zhì),對細(xì)胞的生長、增殖和分化具有重要作用。
以下是對動物細(xì)胞培養(yǎng)血清的詳細(xì)解析:
一、血清的來源與種類
血清是從血液中提取出來的液體部分,它富含細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)、激素、生長因子和其他活性物質(zhì)。根據(jù)來源動物的不同,血清可以分為多種類型,其中最常見的包括胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)、新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS)、小牛血清(Calf Serum)和成牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)等。
胎牛血清:采自5~8個(gè)月胎齡的牛胚胎,是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的血清類型之一。由于其來源的特殊性,胎牛血清中富含多種生長因子和激素,對細(xì)胞的生長和增殖具有顯著的促進(jìn)作用。
新生牛血清:采自出生后07天(或030天)內(nèi)的小牛,其成分與胎牛血清相似,但某些生長因子的含量可能略低。
小牛血清:采自出生30天至1年的小牛,其成分與新生牛血清相近,但隨著時(shí)間的推移,某些生長因子的含量會逐漸下降。
成牛血清:采自成年牛,其成分相對較為穩(wěn)定,但某些生長因子的含量可能較低,且可能含有一些對細(xì)胞生長不利的成分。
此外,根據(jù)血清的處理方式和品質(zhì),還可以將其分為特級、優(yōu)級和標(biāo)準(zhǔn)級等不同等級。特級血清中內(nèi)毒素含量極低,對細(xì)胞的毒性最?。粌?yōu)級血清的內(nèi)毒素含量略高于特級,但仍適用于大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng);標(biāo)準(zhǔn)級血清的內(nèi)毒素含量較高,可能對某些敏感細(xì)胞產(chǎn)生不利影響。
二、血清在動物細(xì)胞培養(yǎng)中的作用
提供基本營養(yǎng)物質(zhì):血清中含有氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)和核酸衍生物等細(xì)胞生長所必需的物質(zhì)。
提供激素和各種生長因子:血清中含有胰島素、生長激素、表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子等多種生長因子和激素,這些物質(zhì)對細(xì)胞的生長和分化具有重要作用。
提供結(jié)合蛋白:血清中的結(jié)合蛋白(如白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白)可以攜帶重要的低分子量物質(zhì)(如維生素、脂肪和激素等),對細(xì)胞代謝有重要作用。
提供促接觸和伸展因子:這些因子有助于細(xì)胞貼壁生長,避免機(jī)械損傷。特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),血清蛋白形成的粘度可以保護(hù)細(xì)胞免受損傷。
對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到保護(hù)作用:血清中含有一些抗蛋白酶成分,可以中和胰蛋白酶的消化作用,保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。此外,血清還含有一些微量元素和離子,這些物質(zhì)在代謝解毒中起重要作用。
根據(jù)細(xì)胞類型選擇血清:不同類型的細(xì)胞對血清的需求不同。例如,某些細(xì)胞可能對胎牛血清特別敏感,而另一些細(xì)胞則可能更適合使用新生牛血清或小牛血清。因此,在選擇血清時(shí),需要了解目標(biāo)細(xì)胞的生長特性和需求。
注意血清的品質(zhì)和批次:不同批次、不同來源的血清在成分和活性上可能存在差異。因此,在使用血清時(shí),需要選擇品質(zhì)可靠、批次穩(wěn)定的血清,并盡量避免頻繁更換血清批次,以免影響細(xì)胞的生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
血清的儲存與處理:血清應(yīng)儲存在-20℃或更低的溫度下,以避免蛋白質(zhì)變性和細(xì)菌污染。在使用前,需要將血清解凍至室溫,并輕輕搖勻以確保成分均勻分布。此外,某些實(shí)驗(yàn)可能需要對血清進(jìn)行特殊處理,如熱滅活以去除補(bǔ)體等有害成分。但需要注意的是,熱滅活可能會導(dǎo)致某些生長因子的失活,因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行權(quán)衡。
綜上所述,動物細(xì)胞培養(yǎng)中的血清是一種重要的培養(yǎng)輔助物質(zhì),對細(xì)胞的生長、增殖和分化具有重要作用。在選擇和使用血清時(shí),需要了解目標(biāo)細(xì)胞的生長特性和需求,并注意血清的品質(zhì)、批次以及儲存與處理等方面的細(xì)節(jié)問題。
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