羊原代腎小管上皮細胞的培養(yǎng)與應用及注意事項！
小楊 / 2025-04-01 09:07:44
腎小管上皮細胞是指腎小管的外面的一層細胞，是研究腎臟疾病的一項重要材料，該細胞分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法、免疫分離法。
1、細胞來源與特性
羊原代腎小管上皮細胞來源于實驗動物的正常腎臟組織，主要分布于腎小管的近端小管、髓袢和遠端小管。其特性包括：
鑒定方法：通過細胞角蛋白-18（CK-18）免疫熒光染色呈陽性確認。
純度與安全性：細胞純度高于90%，且不攜帶HIV-1、HBV、HCV等病原體及細菌、真菌等污染。
形態(tài)特征：貼壁生長，呈現(xiàn)鋪路石狀或不規(guī)則形態(tài)。
2、培養(yǎng)建議
為確保細胞良好的增殖和分化能力，建議使用專用培養(yǎng)基及配套試劑：
培養(yǎng)基組成：
上皮細胞基礎培養(yǎng)基，需添加2%胎牛血清（FBS）、100×濃度的上皮細胞培養(yǎng)添加劑及雙抗（青霉素-鏈霉素）。
保存條件：基礎培養(yǎng)基需4℃避光保存，添加劑及血清需-20℃保存。
3、運輸與保存方式
T25培養(yǎng)瓶：常溫運輸，需觀察細胞貼壁率，若超過85%需立即傳代；懸浮細胞可通過靜置過夜促進貼壁。
凍存管形式：干冰運輸，收到后需盡快解凍復蘇，或暫存于-80℃（可保存1個月）。
4、應用與注意事項
用途：僅限實驗室研究，如腎小管功能、藥物毒性或病理機制研究，不可用于臨床治療或診斷。
注意事項：腎小管上皮細胞的體外培養(yǎng)周期有限，需嚴格遵循培養(yǎng)條件以避免功能異常。
5、臨床相關(guān)背景補充
腎小管上皮細胞的異常脫落（如尿液中檢測到）可能與腎小管病變、感染或移植排斥反應相關(guān)，但此類檢測屬于臨床診斷范疇，與研究用原代細胞的用途不同。
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