羊原代腎小管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)與應(yīng)用及注意事項(xiàng)！
小楊 / 2025-04-01 09:07:44
腎小管上皮細(xì)胞是指腎小管的外面的一層細(xì)胞，是研究腎臟疾病的一項(xiàng)重要材料，該細(xì)胞分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法、免疫分離法。
1、細(xì)胞來(lái)源與特性
羊原代腎小管上皮細(xì)胞來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腎臟組織，主要分布于腎小管的近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管。其特性包括：
鑒定方法：通過(guò)細(xì)胞角蛋白-18（CK-18）免疫熒光染色呈陽(yáng)性確認(rèn)。
純度與安全性：細(xì)胞純度高于90%，且不攜帶HIV-1、HBV、HCV等病原體及細(xì)菌、真菌等污染。
形態(tài)特征：貼壁生長(zhǎng)，呈現(xiàn)鋪路石狀或不規(guī)則形態(tài)。
2、培養(yǎng)建議
為確保細(xì)胞良好的增殖和分化能力，建議使用專用培養(yǎng)基及配套試劑：
培養(yǎng)基組成：
上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基，需添加2%胎牛血清（FBS）、100×濃度的上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑及雙抗（青霉素-鏈霉素）。
保存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基需4℃避光保存，添加劑及血清需-20℃保存。
3、運(yùn)輸與保存方式
T25培養(yǎng)瓶：常溫運(yùn)輸，需觀察細(xì)胞貼壁率，若超過(guò)85%需立即傳代；懸浮細(xì)胞可通過(guò)靜置過(guò)夜促進(jìn)貼壁。
凍存管形式：干冰運(yùn)輸，收到后需盡快解凍復(fù)蘇，或暫存于-80℃（可保存1個(gè)月）。
4、應(yīng)用與注意事項(xiàng)
用途：僅限實(shí)驗(yàn)室研究，如腎小管功能、藥物毒性或病理機(jī)制研究，不可用于臨床治療或診斷。
注意事項(xiàng)：腎小管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)周期有限，需嚴(yán)格遵循培養(yǎng)條件以避免功能異常。
5、臨床相關(guān)背景補(bǔ)充
腎小管上皮細(xì)胞的異常脫落（如尿液中檢測(cè)到）可能與腎小管病變、感染或移植排斥反應(yīng)相關(guān)，但此類檢測(cè)屬于臨床診斷范疇，與研究用原代細(xì)胞的用途不同。
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