芽孢桿菌的保存方法與注意事項(xiàng)及方法選擇建議！
小楊 / 2025-04-21 08:39:14
芽孢桿菌的保存方法因其形成芽孢的特性而具有更強(qiáng)的耐受性，以下為詳細(xì)保存方案及注意事項(xiàng)：
一、保存方法
1、斜面低溫保存法
步驟：將菌種接種于固體斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)至形成芽孢（約24-48小時(shí)），4℃保存。
周期：每3-6個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，芽孢可延長(zhǎng)保存時(shí)間至6個(gè)月以上。
適用場(chǎng)景：實(shí)驗(yàn)室短期保存，操作簡(jiǎn)便。
2、甘油管冷凍保存法
步驟：將菌液（含芽孢）與20%-30%滅菌甘油混合，分裝至凍存管，-80℃保存。
周期：可保存2-5年。
關(guān)鍵點(diǎn)：建議誘導(dǎo)芽孢形成后保存，提升存活率。
3、沙土管保存法
步驟：
滅菌沙土（河沙:泥土=3:1）與芽孢懸液混合。
真空干燥后密封，4℃或室溫避光保存。
周期：2-5年。
優(yōu)勢(shì)：適合無超低溫設(shè)備時(shí)長(zhǎng)期保存。
4、冷凍干燥法（凍干）
步驟：芽孢懸液加保護(hù)劑（如脫脂牛奶），冷凍干燥后密封。
周期：10年以上，菌種庫(kù)首選方法。
設(shè)備需求：需凍干機(jī)，適合專業(yè)機(jī)構(gòu)。
二、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
無菌操作：全程滅菌處理，避免污染。
芽孢誘導(dǎo)：采用貧營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基或高溫（80℃處理10分鐘），促進(jìn)芽孢形成。
生物安全：若為致病菌種，需在生物安全柜操作，遵循實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程。
復(fù)蘇方法：凍存菌種需快速解凍（37℃水浴），沙土管菌種需無菌接種至液體培養(yǎng)基活化。
三、方法選擇建議
短期使用：斜面保存，定期轉(zhuǎn)接。
中期研究：甘油管保存，兼顧便利與時(shí)長(zhǎng)。
長(zhǎng)期保藏：凍干或沙土管法，確保遺傳穩(wěn)定性。
通過合理選擇方法并嚴(yán)格操作，可有效維持
芽孢桿菌的活性和功能，滿足不同需求。
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