乳糖生化管:廣泛應(yīng)用于腸道致病菌與非致病菌的鑒別!
小楊 / 2025-07-17 09:20:59
乳糖生化管是微生物學(xué)中用于檢測(cè)微生物是否能分解乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的常用生化鑒定工具,廣泛應(yīng)用于腸道致病菌與非致病菌的鑒別(如
大腸桿菌與
傷寒桿菌的區(qū)分)。其設(shè)計(jì)原理基于微生物代謝乳糖的生化特性,通過(guò)培養(yǎng)基成分和指示劑的變化直觀反映結(jié)果。
一、乳糖生化管的核心組成
乳糖生化管本質(zhì)是一種液體培養(yǎng)基試管,內(nèi)含特定成分以實(shí)現(xiàn)功能,核心組成包括:
1、基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)成分
蛋白胨、牛肉膏等:提供微生物生長(zhǎng)所需的碳源(非乳糖)、氮源、維生素等,保證細(xì)菌正常繁殖。
2、關(guān)鍵底物:乳糖
作為唯一可檢測(cè)的碳源,若微生物能產(chǎn)生乳糖酶(β- 半乳糖苷酶),可分解乳糖為葡萄糖和半乳糖,進(jìn)一步代謝產(chǎn)酸或產(chǎn)氣。
3、酸堿指示劑:溴甲酚紫(或酚紅)
顏色隨 pH 變化:中性時(shí)呈紫色(或紅色);若微生物分解乳糖產(chǎn)酸(pH 下降至 6.8 以下),指示劑變?yōu)辄S色,這是 “產(chǎn)酸” 的標(biāo)志。
4、產(chǎn)氣檢測(cè)裝置:小倒管(杜氏管)
試管內(nèi)倒置的小玻璃管,用于捕捉微生物代謝乳糖產(chǎn)生的氣體。若小倒管內(nèi)出現(xiàn)氣泡,即為 “產(chǎn)氣” 的標(biāo)志。
5、其他輔助成分
部分配方含氯化鈉(維持滲透壓),或調(diào)整 pH 至中性(確保指示劑初始狀態(tài)穩(wěn)定)。
二、檢測(cè)原理與結(jié)果判斷
微生物接種到乳糖生化管后,35-37℃培養(yǎng) 18-24 小時(shí)(或更長(zhǎng)時(shí)間),根據(jù)培養(yǎng)基顏色和小倒管狀態(tài)判斷結(jié)果:
結(jié)果類(lèi)型 外觀特征 含義
產(chǎn)酸產(chǎn)氣 培養(yǎng)基變黃,小倒管內(nèi)有氣泡 微生物能分解乳糖,代謝過(guò)程產(chǎn)酸(pH 下降)且產(chǎn)氣
只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 培養(yǎng)基變黃,小倒管內(nèi)無(wú)氣泡 能分解乳糖產(chǎn)酸,但代謝不產(chǎn)生氣體
不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 培養(yǎng)基仍為紫色(或紅色),無(wú)氣泡 不能分解乳糖(無(wú)乳糖酶),依賴(lài)其他營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)
三、主要應(yīng)用場(chǎng)景
乳糖生化管的核心價(jià)值是通過(guò)乳糖代謝特性區(qū)分微生物類(lèi)群,尤其在腸道菌鑒定中不可替代:
1、腸道致病菌與非致病菌的初步鑒別
非致病菌(如
大腸桿菌):多數(shù)能分解乳糖,表現(xiàn)為 “產(chǎn)酸產(chǎn)氣”(典型特征)。
這是糞便標(biāo)本微生物檢測(cè)的基礎(chǔ)步驟,可快速縮小目標(biāo)菌范圍。
2、環(huán)境或食品微生物的篩選
例如:檢測(cè)飲用水中是否存在腸道污染菌(若乳糖管產(chǎn)酸產(chǎn)氣,提示可能有
大腸桿菌等污染)。
3、微生物分類(lèi)學(xué)輔助鑒定
作為細(xì)菌生化鑒定系統(tǒng)的指標(biāo)之一(如腸桿菌科細(xì)菌的鑒定中,乳糖發(fā)酵是關(guān)鍵性狀)。
四、使用注意事項(xiàng)
1、接種與培養(yǎng)
需從純培養(yǎng)物中挑取單菌落接種,避免雜菌干擾;培養(yǎng)時(shí)間需足夠(若 24 小時(shí)無(wú)結(jié)果,可延長(zhǎng)至 48 小時(shí),部分菌代謝較慢)。
2、結(jié)果判斷誤區(qū)
若微生物僅利用蛋白胨(不分解乳糖),可能因代謝產(chǎn)堿(如脫氨基作用)使培養(yǎng)基變深紫,需與 “不分解乳糖” 區(qū)分(核心看是否變黃)。
小倒管氣泡需排除 “接種時(shí)帶入空氣” 的干擾(接種后輕甩試管,若氣泡消失則為誤判)。
3、與其他生化管的配合
乳糖管通常與葡萄糖管、蔗糖管等聯(lián)合使用,通過(guò)多種碳源代謝結(jié)果綜合鑒定微生物(如區(qū)分 “只分解乳糖” 和 “能分解多種糖類(lèi)” 的菌)。
五、總結(jié)
乳糖生化管是利用 “底物 - 代謝產(chǎn)物 - 指示劑”聯(lián)動(dòng)原理設(shè)計(jì)的簡(jiǎn)易工具,通過(guò) “顏色變化 + 氣泡”直觀反映微生物的乳糖代謝能力,在腸道菌鑒定、污染檢測(cè)等領(lǐng)域是性?xún)r(jià)比極高的基礎(chǔ)手段。其核心優(yōu)勢(shì)在于操作簡(jiǎn)單、結(jié)果明確,至今仍是微生物實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)耗材。
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