實驗操作后對生物安全柜進行清潔和消毒的具體步驟與要點!
小楊 / 2025-07-19 09:22:06
百歐博偉生物:操作后對生物安全柜的清潔和消毒是避免污染殘留、保障后續(xù)實驗安全及設備長期有效運行的關鍵環(huán)節(jié),需遵循 “先清除污染物→再消毒表面→最后維護設備” 的邏輯,結合污染程度和設備特性選擇合適方法。以下是具體步驟和要點:
一、基礎準備:確保操作安全,減少二次污染
1、個人防護不松懈
清潔消毒前需佩戴好個人防護裝備(PPE),如一次性手套(建議戴雙層,防止操作中手套破損)、實驗服(必要時穿防護服)、護目鏡(避免消毒劑飛濺),避免直接接觸污染表面。
2、等待氣流穩(wěn)定,排出殘留氣溶膠
實驗結束后,不要立即關閉生物安全柜風機,需保持風機運行 5-10 分鐘(Ⅱ 級及以上安全柜)—— 利用垂直氣流和 HEPA 過濾器將柜內可能殘留的氣溶膠(如操作中產(chǎn)生的微生物飛沫)全部過濾排出,避免清潔時氣溶膠擴散。
二、核心步驟:分區(qū)域清潔消毒,覆蓋所有接觸表面
(一)先清除可見污染物,避免消毒不徹底
1、處理液體或固體污染物殘留
若有液體泄漏(如培養(yǎng)基、菌液):先用吸水紙(或無菌紗布)輕輕覆蓋吸附(不要擦拭,避免氣溶膠擴散),再用鑷子夾取吸水紙放入專用生物垃圾袋(污染區(qū)暫存);
若有固體污染物(如破碎的培養(yǎng)皿碎片、組織塊):用鑷子或專用工具(避免徒手接觸)收集,放入銳器盒(尖銳物品)或生物垃圾袋(非尖銳),避免劃傷臺面或手套。
2、移除所有物品,分類處理
將柜內實驗用品(如試劑瓶、未用完的耗材)移出:清潔物品(如未污染的試劑)放回原儲存處;污染物品(如帶菌培養(yǎng)皿)密封后按生物安全等級要求處理(如高壓滅菌);
移除柜內配件(如移液器架、支架):若已污染,需單獨消毒(如浸泡在 75% 酒精中 30 分鐘);若清潔,可直接放回指定位置。
(二)選擇合適消毒劑,全面消毒所有表面
消毒的核心是“覆蓋所有可能接觸污染物的表面”,包括工作臺面、內側壁、前窗玻璃內側、柜內頂部、出風口格柵、角落縫隙等,消毒劑需滿足 “有效殺滅目標微生物 + 不損傷設備” 的要求。
1、消毒劑選擇原則
優(yōu)先用75% 酒精(適用大部分場景,殺菌效果可靠,對設備無腐蝕性,可用于 HEPA 過濾器附近、臺面、玻璃等);
若污染嚴重(如高致病性微生物),可使用中效消毒劑,但需提前確認設備兼容性(避免使用含氯消毒劑、過氧乙酸等強腐蝕性試劑 —— 可能損壞工作臺面、密封條或 HEPA 過濾器);
避免用刺激性強或易殘留的消毒劑(如醛類,可能影響后續(xù)細胞培養(yǎng)等實驗)。
2、具體消毒操作
工作臺面及內側壁:用蘸有消毒劑的無菌抹布(或一次性消毒濕巾)按 “從后到前、從左到右” 的順序擦拭(覆蓋所有區(qū)域,包括邊角和縫隙),重點擦拭操作區(qū)和污染區(qū)(如放置過廢液缸的位置);
前窗玻璃內側:緩慢降下前窗至 “消毒位置”(或保持開啟狀態(tài)但避免手部伸出柜外),用消毒劑擦拭玻璃內側(注意不要用力刮擦,防止玻璃磨損);
柜內頂部及出風口:輕輕擦拭頂部表面(避免觸碰 HEPA 過濾器出風口格柵,防止損壞),若格柵有灰塵,可先用無菌毛刷輕掃,再用消毒劑擦拭;
配件消毒:移液器架、試管架等配件需拆卸后單獨擦拭消毒,或浸泡在消毒劑中 10-15 分鐘(根據(jù)消毒劑說明),再用無菌水沖洗(若后續(xù)需無菌使用)。
3、作用時間保障
消毒劑需在表面保持濕潤狀態(tài)至少 10-15 分鐘,確保徹底殺滅殘留微生物,再用無菌水抹布(若需去除消毒劑殘留)或干抹布擦凈。
三、收尾工作:設備維護與記錄,為下次使用做準備
1、關閉設備,規(guī)范斷電
消毒完成后,將前窗玻璃關閉至 “關閉” 位置(避免外界灰塵進入),關閉風機電源;
若長期不用(如超過 24 小時),可開啟紫外燈照射 30 分鐘(強化表面消毒),但需注意:紫外燈僅用于輔助消毒,不能替代化學消毒,且照射后需通風片刻(避免臭氧殘留)。
2、廢棄物處理,避免污染擴散
所有污染性廢棄物(如用過的吸水紙、手套、消毒抹布)需放入雙層生物安全垃圾袋,密封后按實驗室規(guī)定處理(如高壓滅菌后再丟棄);
銳器盒需蓋緊,放入專用危險品回收箱,由專業(yè)機構處理。
3、記錄使用狀態(tài),便于追溯和維護
在生物安全柜使用記錄表中填寫:
本次清潔消毒時間、消毒劑類型及作用時間;
設備運行是否有異常(如臺面是否破損、風機是否有噪音);
下次維護提醒(如過濾器檢測時間、紫外燈更換時間)。
注意事項:避免常見錯誤,保護設備和效果
禁止用高壓水槍或大量水沖洗:生物安全柜內部有電路和 HEPA 過濾器,進水可能導致設備損壞或過濾器失效;
HEPA 過濾器不可拆卸清潔:過濾器僅能通過氣流過濾污染物,不能用水或消毒劑清洗,若發(fā)現(xiàn)過濾器堵塞(如風機風壓異常),需聯(lián)系專業(yè)人員檢測更換;
消毒頻率根據(jù)污染風險調整:處理普通細胞培養(yǎng)后可常規(guī)消毒;處理病原微生物(如
細菌、
病毒)后需強化消毒(如增加消毒劑濃度或延長作用時間);發(fā)生嚴重泄漏(如大量菌液溢出)后,需先用含氯消毒劑覆蓋污染區(qū) 30 分鐘,再按常規(guī)步驟消毒(需提前確認設備耐腐蝕性)。
總之,操作后清潔消毒的核心是“無死角覆蓋 + 有效消毒 + 設備保護”,只有徹底清除殘留污染物,才能確保生物安全柜在下一次使用時,依然能有效保護人員、樣品和環(huán)境。
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