大豆胰酪蛋白胨肉湯的基本原理和使用方法及注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-08-08 09:08:01
一、基本原理
大豆胰酪蛋白胨肉湯是一種廣泛用于微生物培養(yǎng)的通用型液體培養(yǎng)基,主要用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng)、無(wú)菌檢查、環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)等場(chǎng)景。其配方設(shè)計(jì)基于微生物生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)需求,核心原理如下:
1、營(yíng)養(yǎng)成分提供
胰酪蛋白胨(Casein Digest):由酪蛋白經(jīng)胰酶消化而成,富含氨基酸、多肽等含氮物質(zhì),為微生物提供氮源、碳源和生長(zhǎng)因子。
大豆蛋白胨(Soybean Digest):大豆蛋白經(jīng)酶解后的產(chǎn)物,補(bǔ)充胰酪蛋白胨中可能缺乏的氨基酸和維生素,拓寬培養(yǎng)基對(duì)不同微生物的適用性。
氯化鈉(NaCl):維持培養(yǎng)基的滲透壓,模擬微生物自然生長(zhǎng)環(huán)境的離子平衡。
水:作為溶劑,保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的溶解和微生物代謝的液體環(huán)境。
2、適用性
由于營(yíng)養(yǎng)成分全面,
SCD 肉湯可支持多種革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌及部分真菌的生長(zhǎng),尤其適用于需氧菌和兼性厭氧菌的增菌,是醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域無(wú)菌檢查的常用培養(yǎng)基(符合《中國(guó)藥典》等標(biāo)準(zhǔn))。
二、使用方法
1、培養(yǎng)基制備(以干粉培養(yǎng)基為例)
稱(chēng)量與溶解:根據(jù)說(shuō)明書(shū)稱(chēng)取適量 SCD 肉湯干粉(如每 1000mL 水加 30g),加入蒸餾 water 或純化水中,攪拌至完全溶解。
分裝:將溶解后的培養(yǎng)基分裝至錐形瓶、試管或培養(yǎng)瓶中(如需滅菌后使用,注意預(yù)留膨脹空間)。
滅菌:121℃高壓蒸汽滅菌 15-20 分鐘(滅菌條件需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn),避免營(yíng)養(yǎng)成分破壞或滅菌不徹底)。
冷卻:滅菌后取出,待冷卻至 40-50℃左右備用(如需立即使用,可快速冷卻至室溫)。
2、樣品接種與培養(yǎng)
接種:取待檢測(cè)樣品(如液體樣品、固體樣品的浸出液等),按無(wú)菌操作要求加入到滅菌后的 SCD 肉湯中(通常樣品與培養(yǎng)基比例為 1:10,具體可根據(jù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整)。
培養(yǎng)條件:
溫度:一般需氧菌培養(yǎng)溫度為 30-35℃;如需檢測(cè)特定微生物(如嗜冷菌),可調(diào)整至 20-25℃。
時(shí)間:通常培養(yǎng) 18-24 小時(shí),若結(jié)果為陰性,可延長(zhǎng)至 48 小時(shí)(根據(jù)檢測(cè)目的確定)。
環(huán)境:需氧培養(yǎng),無(wú)需厭氧條件(若培養(yǎng)厭氧菌,需搭配厭氧裝置)。
3、結(jié)果觀察與后續(xù)操作
觀察:培養(yǎng)后觀察培養(yǎng)基是否渾濁(提示微生物生長(zhǎng)),或有無(wú)沉淀、菌膜形成。
后續(xù)檢測(cè):若培養(yǎng)基渾濁,可進(jìn)一步接種至固體培養(yǎng)基(如營(yíng)養(yǎng)瓊脂)進(jìn)行分離純化,或通過(guò)生化試驗(yàn)、分子生物學(xué)方法鑒定微生物種類(lèi)。
三、注意事項(xiàng)
干粉培養(yǎng)基應(yīng)密封保存在陰涼干燥處,避免吸潮結(jié)塊。
滅菌過(guò)程需嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間,過(guò)度滅菌可能導(dǎo)致培養(yǎng)基變色、營(yíng)養(yǎng)流失。
操作全程需無(wú)菌操作,避免環(huán)境中雜菌污染,影響檢測(cè)結(jié)果。
若培養(yǎng)基滅菌后出現(xiàn)渾濁、沉淀或顏色異常(正常為淡黃色澄清液體),應(yīng)廢棄,不可使用。
通過(guò)以上步驟,
SCD 肉湯可高效用于微生物的增菌和初步篩查,是微生物檢測(cè)中基礎(chǔ)且重要的培養(yǎng)基之一。
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