改良察氏液體培養(yǎng)基的配制與原理及使用方法與注意事項(xiàng)！
小楊 / 2025-11-05 09:07:28
改良察氏液體培養(yǎng)基通過優(yōu)化碳氮源、補(bǔ)充微量元素，適配特定微生物（如真菌、放線菌）的營(yíng)養(yǎng)需求，用于菌種擴(kuò)大培養(yǎng)、代謝產(chǎn)物發(fā)酵等，使用需遵循無(wú)菌配制、接種培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化流程。
一、改良察氏液體培養(yǎng)基的配方
改良察氏液體培養(yǎng)基的核心是在基礎(chǔ)配方上調(diào)整碳氮源比例、補(bǔ)充微量元素，以下是 3 類常用且適配不同場(chǎng)景的配方，均為 1L 體系（去離子水配制）：
1、通用型改良配方（適配多數(shù)真菌/放線菌）
蔗糖 30g（碳源，提供能量）
硝酸鈉 2g（氮源，合成蛋白質(zhì)）
磷酸二氫鉀 1g（磷源，維持滲透壓）
硫酸鎂（MgSO??7H?O）0.5g（微量元素，激活酶系）
氯化鉀 0.5g（鉀源，調(diào)節(jié)代謝）
硫酸亞鐵（FeSO??7H?O）0.01g（鐵離子，參與呼吸鏈）
pH 6.0-6.5
2、真菌高產(chǎn)代謝物配方（如青霉素合成菌）
葡萄糖 20g（替換蔗糖，更易吸收）
硝酸鈉 3g（提高氮源比例，促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)）
磷酸二氫鉀 1.5g（強(qiáng)化磷供應(yīng)，支持代謝產(chǎn)物合成）
硫酸鎂 0.8g
氯化鉀 0.3g
硫酸鋅 0.02g（補(bǔ)充鋅元素，提升酶活性）
pH 5.5-6.0
3、放線菌專用配方（如鏈霉菌培養(yǎng)）
可溶性淀粉 25g（碳源，適配放線菌分解特性）
硝酸鉀 2g（替換硝酸鈉，更穩(wěn)定）
磷酸二氫鉀 1g
硫酸鎂 0.5g
氯化鈉 0.5g
硫酸錳 0.01g（錳元素，促進(jìn)抗生素合成）
pH 6.5-7.0
二、改良核心原理
基礎(chǔ)框架延續(xù)察氏培養(yǎng)基，以蔗糖為碳源、硝酸鈉為氮源，滿足微生物基礎(chǔ)能量和合成需求。
改良方向聚焦“針對(duì)性適配”，比如調(diào)整碳氮比適配目標(biāo)菌種，添加硫酸鎂、氯化鉀等微量元素促進(jìn)酶活性。
去除或替換原配方中抑制性成分，降低 pH 波動(dòng)，提升培養(yǎng)基穩(wěn)定性和微生物生長(zhǎng)效率。
三、使用方法
配方稱量：按改良配方精準(zhǔn)稱取蔗糖、硝酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂等成分，溶于適量去離子水。
調(diào)節(jié) pH：用鹽酸或氫氧化鈉將培養(yǎng)基 pH 調(diào)至目標(biāo)值（通常 5.5-7.0，依菌種調(diào)整）。
分裝滅菌：將培養(yǎng)基分裝至三角瓶等容器，121℃高壓蒸汽滅菌 20 分鐘，冷卻至 45℃以下備用。
無(wú)菌接種：在超凈工作臺(tái)中，按 1%-5% 接種量接入活化后的菌種。
培養(yǎng)條件：置于搖床（150-200rpm）或靜置培養(yǎng)，溫度控制在 25-30℃（真菌）或 28-32℃（放線菌），培養(yǎng)時(shí)間 48-120 小時(shí)。
四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
成分溶解時(shí)需充分?jǐn)嚢瑁苊庹崽堑任镔|(zhì)結(jié)塊影響滅菌效果。
滅菌后需快速冷卻，防止?fàn)I養(yǎng)成分降解，同時(shí)避免雜菌污染。
接種前需確認(rèn)培養(yǎng)基無(wú)渾濁、無(wú)異味，確保無(wú)菌狀態(tài)。
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