李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基的正確保存方法及注意事項(xiàng)！
小楊 / 2025-11-12 09:46:59
李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基的保存質(zhì)量直接影響其后續(xù)增菌效果（如營養(yǎng)有效性、選擇性抑制能力），需根據(jù)其不同形態(tài)（粉末狀、已滅菌液體狀、未滅菌配制液）針對性采取保存措施，同時(shí)遵循“避光、防潮、控溫、防污染”四大核心原則。以下是具體保存方法及注意事項(xiàng)，結(jié)合培養(yǎng)基特性和實(shí)際使用場景說明：
一、核心前提：明確培養(yǎng)基形態(tài)，針對性保存
培養(yǎng)基形態(tài) 保存核心目標(biāo) 關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)
粉末狀（未開封/開封） 防止吸潮結(jié)塊、成分降解 潮濕導(dǎo)致營養(yǎng)成分失效，光照破壞選擇性物質(zhì)
已滅菌液體培養(yǎng)基（分裝后） 保持無菌狀態(tài)，避免營養(yǎng)沉淀/變質(zhì) 反復(fù)凍融破壞營養(yǎng)，室溫放置滋生雜菌
未滅菌配制液（溶解后未滅菌） 抑制雜菌滋生，暫時(shí)保持成分穩(wěn)定 室溫放置易污染，長時(shí)間儲存成分降解
二、分形態(tài)詳細(xì)保存方法
1、粉末狀培養(yǎng)基（最常見初始形態(tài)）
粉末狀是培養(yǎng)基的出廠形態(tài)，含胰酪胨、酵母浸粉等營養(yǎng)成分，選擇性抑制劑（部分需用戶自行添加，即“基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 添加劑”組合），保存需重點(diǎn)防潮、避光、控溫。
未開封粉末（原廠密封狀態(tài)）：
儲存環(huán)境：2-25℃陰涼干燥處（優(yōu)先選擇 2-8℃冷藏，尤其南方潮濕地區(qū)），避免陽光直射或靠近熱源（如暖氣、烘箱）。
包裝保護(hù)：保持原廠鋁箔袋/密封瓶完好，避免擠壓導(dǎo)致包裝破損（若包裝破損，即使未開封也可能吸潮）。
保質(zhì)期：嚴(yán)格遵循產(chǎn)品標(biāo)簽上的“有效期”，過期后嚴(yán)禁使用（選擇性抑制劑可能降解，營養(yǎng)成分可能氧化）。
已開封粉末（部分使用后剩余）：
密封防潮：每次取用后立即擰緊瓶蓋（若為鋁箔袋，需擠出袋內(nèi)空氣后用封口夾夾緊，或轉(zhuǎn)移至無菌、干燥的帶蓋玻璃瓶中），放入硅膠干燥劑（定期更換，觀察到干燥劑變色即失效），防止粉末吸潮結(jié)塊（結(jié)塊后營養(yǎng)成分難以均勻溶解，影響增菌效果）。
儲存溫度：同未開封狀態(tài)（2-25℃），但建議優(yōu)先 2-8℃冷藏，延長成分穩(wěn)定性（尤其夏季高溫高濕環(huán)境）。
使用期限：開封后建議1 個(gè)月內(nèi)用完（即使仍在總有效期內(nèi)），避免長時(shí)間接觸空氣導(dǎo)致成分降解（如酵母浸粉中的維生素易氧化）。
避免污染：取用粉末時(shí)，使用無菌、干燥的勺（專用勺，不與其他試劑混用），避免手或其他污染物接觸瓶口/袋口，防止雜菌帶入。
2、已滅菌液體培養(yǎng)基（溶解、分裝、滅菌后）
粉末溶解后經(jīng)高壓蒸汽滅菌（通常 121℃、15-20 分鐘），即為可直接使用的液體培養(yǎng)基，需重點(diǎn)保持無菌和營養(yǎng)穩(wěn)定，避免二次污染。
短期保存（1 周內(nèi)使用）：
儲存條件：2-8℃冷藏，垂直放置（如試管、三角瓶），避免傾倒導(dǎo)致污染；若為大體積儲存（如 500mL 三角瓶），需用無菌透氣塞（如棉塞 + 牛皮紙）封口，防止冷藏過程中冷凝水回流污染。
檢查要求：使用前觀察外觀，若出現(xiàn)渾濁、沉淀（非低溫導(dǎo)致的可逆沉淀）、氣泡、菌落生長，說明已污染，嚴(yán)禁使用。
長期保存（1-3 個(gè)月，需謹(jǐn)慎）：
分裝密封：滅菌后立即分裝至無菌離心管或螺口試管（每管 10-20mL，避免反復(fù)取用），擰緊螺口蓋，防止凍融時(shí)吸潮。
冷凍儲存：-20℃冷凍保存（避免 - 80℃超低溫，防止培養(yǎng)基成分結(jié)冰后破裂，解凍后營養(yǎng)不均勻）；嚴(yán)禁反復(fù)凍融（建議按單次用量分裝，一次解凍用完），反復(fù)凍融會破壞蛋白質(zhì)等營養(yǎng)成分，降低增菌效率。
解凍方法：使用前從冷凍室取出，放入 37-45℃水浴鍋中緩慢解凍（避免室溫長時(shí)間解凍，防止雜菌滋生），解凍后輕輕搖勻，檢查無異常即可使用。
3、未滅菌配制液（粉末溶解后未滅菌）
此類液體僅為“粉末 + 蒸餾水/無菌水”的溶解液，未經(jīng)過滅菌，含大量雜菌，不建議長期保存，僅適用于臨時(shí)配制后立即滅菌的場景。
臨時(shí)保存（≤24 小時(shí)）：
儲存條件：2-8℃冷藏，用無菌紗布或透氣塞封口（防止微生物大量繁殖），且必須在 24 小時(shí)內(nèi)完成滅菌（超過 24 小時(shí)雜菌會過度生長，即使后續(xù)滅菌，也可能產(chǎn)生毒素影響檢測）。
使用限制：若發(fā)現(xiàn)液體已渾濁、有異味，即使未超過 24 小時(shí)，也需丟棄重新配制，避免影響后續(xù)增菌。
三、通用保存注意事項(xiàng)（關(guān)鍵避坑點(diǎn)）
避光保存：
李氏菌增菌肉湯中的選擇性抑制劑對光敏感，光照會導(dǎo)致其分解，失去對革蘭氏陰性菌的抑制作用，因此無論何種形態(tài)，均需避免陽光直射或紫外線照射（如不放在實(shí)驗(yàn)室靠窗的試劑架，儲存柜內(nèi)避免開燈）。
標(biāo)簽清晰：所有保存的培養(yǎng)基（尤其是開封粉末、已滅菌液體）需貼清晰標(biāo)簽，注明“名稱、配制日期/開封日期、滅菌日期、有效期”，避免與其他培養(yǎng)基混淆（如與普通營養(yǎng)肉湯混淆，失去選擇性）。
遠(yuǎn)離污染源：儲存區(qū)域需遠(yuǎn)離微生物培養(yǎng)區(qū)、樣本處理區(qū)，避免灰塵、氣溶膠污染；粉末狀培養(yǎng)基不與液體試劑、濕態(tài)樣本同柜存放，防止交叉污染和吸潮。
合規(guī)性驗(yàn)證：若用于食品安全檢測或臨床檢測，保存后的培養(yǎng)基需定期進(jìn)行質(zhì)量驗(yàn)證（如接種標(biāo)準(zhǔn)菌株
單核細(xì)胞增生李斯特菌，觀察增菌效果；接種雜菌如
大腸桿菌，觀察抑制效果），確保其符合標(biāo)準(zhǔn)要求。
總結(jié)：不同形態(tài)保存要點(diǎn)速查表
培養(yǎng)基形態(tài) 儲存溫度 核心措施 建議使用期限
未開封粉末 2-25℃（優(yōu)先 2-8℃） 密封、避光、防潮 按產(chǎn)品有效期
已開封粉末 2-8℃ 立即密封、加干燥劑、專用勺取用 開封后 1 個(gè)月內(nèi)
已滅菌液體（短期） 2-8℃ 無菌封口、垂直放置、防污染 1 周內(nèi)
已滅菌液體（長期） -20℃ 按單次用量分裝、避免反復(fù)凍融 1-3 個(gè)月
未滅菌配制液 2-8℃ 臨時(shí)保存、24 小時(shí)內(nèi)滅菌 ≤24 小時(shí)
遵循以上方法可最大限度保持
李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基的營養(yǎng)完整性和選擇性，確保后續(xù)增菌實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，避免因保存不當(dāng)導(dǎo)致檢測結(jié)果假陰性或假陽性。
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