為何培養(yǎng)細胞生長減慢,任何改進?。ㄞD(zhuǎn)沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)購買者心得)
我是沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)的,4月在中國微生物菌種查詢網(wǎng)訂購了一支293T 人胚腎細胞 ,他們實驗室老師1周左右復(fù)蘇好然后郵寄過來的,我這邊收到細胞后就倒置在顯微鏡下觀察,當時的新報狀態(tài)還行,由于當時細胞還沒有長慢,這邊就是換了我們自己配置的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),但是后續(xù)觀察細胞生長的有點慢,(因?qū)嶒灲?jīng)驗不足就電話咨詢培養(yǎng)老師 老師一聽說我們這邊更換了不同培養(yǎng)液有關(guān))于是才了解,只是感概初學(xué)者一定要先了解一下細胞生長慢的原因,對癥下藥。
1,由于更換不同培養(yǎng)液或血清,
2,培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分
3,如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺,乏或已被破壞。
4,培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染
5,試劑保存不當
我們應(yīng)該如何處理:
1,比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。
2,增加起始培養(yǎng)細胞濃度。讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3,換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4,補加谷氨酰胺或生長因子。
5,用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;?span>用抗生素除菌。
6,血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在 2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在 2-8℃保存,并在 2 周內(nèi)用完。