硝酸鹽陰性不動(dòng)桿菌（Acinetobacter anitratum）屬不動(dòng)桿菌屬?？裳趸纸馄咸烟?、木糖、乳酸等，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。致病力不強(qiáng)，可致傷口感染、腦膜炎等。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào)：Bio-118228
規(guī)格：甘油/培養(yǎng)物
拉丁屬名：Acinetobacter Anitratum
菌株名稱：硝酸鹽陰性不動(dòng)桿菌
生物安全等級(jí)：2
曾定名：硝酸鹽陰性不動(dòng)桿菌（Acinetobacter anitratum（Schaub et Hauber）Brison and Prévot)
性狀：乳白或白色、凍干粉
用途：硝酸鹽肉湯、緩沖動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基的質(zhì)控用菌株
包裝：菌種管
用途：硝酸鹽肉湯、緩沖動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基的質(zhì)控
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、使用方法和要求
1、培養(yǎng)基：普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂（培養(yǎng)基 51）或適宜培養(yǎng)基。
2、培養(yǎng)條件：35~37℃，需氧。
3、啟開方法：
1)復(fù)蘇菌種前應(yīng)準(zhǔn)備各適于該菌種生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，所有操作均應(yīng)在合適的生物安全防護(hù)條件下進(jìn)行；
2)啟開菌種宜采用鋸開法(鋸開前用 75%酒精棉消毒菌種管外壁)。用吸管將液體培養(yǎng)基 0.5ml 左右注入被啟開的菌種安瓿中并吹打，使安瓿中的凍干菌種溶解成菌懸液；
3)將上述菌懸液全部吸出，分別接種到固體斜面和液體培養(yǎng)基中，于 35~37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 18~24 小時(shí)；
4)次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況，如菌種未生長(zhǎng)，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至 72 小時(shí)；
5)復(fù)蘇后的菌種按規(guī)定使用。
三、儲(chǔ)藏條件
暫不啟開的安瓿可置于 2~8℃保藏。
四、注意事項(xiàng)
1、該菌種僅限用于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)及研究用，不能用于商業(yè)用途。
2、如使用該菌種發(fā)表文章，應(yīng)在文章中注明。
3、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
五、菌種的培養(yǎng)
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的 菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些 菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
六、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲、雞胚內(nèi)并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
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