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蘭小菇的生物特性與應(yīng)用領(lǐng)域及培養(yǎng)與保藏!
小楊 / 2023-06-05 09:28:46


蘭小菇,小菇屬一類真菌,多腐生于高山林間落葉上,對纖維素有強烈的分解能力,秋冬樹葉脫落于地面,接觸土表保濕的枯枝朽葉,小菇屬真菌又可侵入具有生命力的天麻種子中,使種子共生萌發(fā),因此小菇屬一類真菌,主要營腐生生活,但也有兼性寄生的特性。

一、菌種簡介
平臺編號:Bio-32840
規(guī)格:培養(yǎng)物
拉丁屬名:Mycena Violacella
中文名稱:蘭小菇
拉丁屬名:Mycena
種名加詞:violacella (Speg.) Singer
收藏時間*:2005-8-15
來源歷史:中國林科院亞熱帶林業(yè)研究所
原產(chǎn)國:中國
資源歸類編碼:15152143108
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;教學(xué)
生物危害程度:四類
致病對象:無
采集地區(qū):山東金鄉(xiāng)
培養(yǎng)基信息:培養(yǎng)基編號: 14 培養(yǎng)基名稱: PDA
培養(yǎng)溫度:25
資源保護類型:培養(yǎng)物
保藏方法:定期移植法
共享方式:公益性共享
提供形式:斜面培養(yǎng)物
實物狀態(tài):有實物
用途:研究
注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

二、生物特性
1、好氣
小菇屬等天麻種子共生萌發(fā)菌,是一類好氣真菌,它們在森林中主要分布在林間枯枝落葉層及表層土壤中,在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn),如果培養(yǎng)料裝得太多或瓶蓋太緊,不會影響到這類菌的生長,生長速度延緩,處長培養(yǎng)時間。
2、對天麻塊莖無侵染能力
小菇屬真菌,是一種弱寄生菌,它們只能侵染天麻種胚基部細(xì)胞。還沒有觀察到侵染天麻種子發(fā)芽的原球莖和營養(yǎng)繁殖莖、米麻、白麻。當(dāng)蜜環(huán)菌侵入原球莖分化出的營養(yǎng)繁殖莖后,小菇屬真菌和蜜環(huán)菌可同時存在于同一個營養(yǎng)繁殖莖中,其對天麻的營養(yǎng)作用逐漸被蜜環(huán)菌所代替。
3、溫度對菌絲體生長的影響
萌發(fā)菌在15 ℃-30 ℃溫度范圍內(nèi)均能生長。以25 ℃菌絲生長最快,低于20 ℃或高于25 ℃菌絲生長速度明顯減漫。
4、基物含水量對萌發(fā)菌生長的影響
將鋸木屑和麥麩按體積1:1混合,結(jié)果表明,不同菌株對基物含水量要求不同。一般適宜含水量為基物重量的100-200%。
5、PH值對萌發(fā)菌生長的影響
試驗結(jié)果表明,在培養(yǎng)過程中PH值向酸性方向變化。中性及偏酸性條件均利于小菇屬真菌菌絲生長,但以PH值5.0-5.5最適宜,堿性條件不利于菌絲生長。

三、應(yīng)用領(lǐng)域
天麻為我國名貴中藥材,屬異養(yǎng)性植物,種子必須靠小菇屬(Mycena)一類真菌侵染才能正常發(fā)芽,其后的生長又需要蜜環(huán)菌菌索的侵入提供營養(yǎng)才能繼續(xù)生長完成其生活史。天麻Seeds進(jìn)行萌發(fā)與蘭小菇orchidicola共生。天麻Gastrodiaelata種子與蘭小菇Mycenaorchidicola的共生萌發(fā)試驗表明蘭小菇可與天麻種子共生促進(jìn)天麻種子萌發(fā)并形成原球莖。
蘭小菇(Mycena orchidicola)在石斛栽培中的應(yīng)用技術(shù),先分別培養(yǎng)菌根真菌和石斛苗,再將菌根真菌與石斛苗共生栽培。采用該項新技術(shù),可大大縮短石斛的生長周期;提高石斛產(chǎn)量、有效成分含量。該項技術(shù)栽培方法簡單、投資少、不施任何肥料和農(nóng)藥,生產(chǎn)出的石斛為綠色產(chǎn)品。

四、菌種的培養(yǎng)
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

五、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害。

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