細(xì)胞簡介
平臺編號：Bio-114973
規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息：240E
細(xì)胞名稱：兔骨髓瘤細(xì)胞240E
產(chǎn)品規(guī)格：T25培養(yǎng)瓶x1；1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量：1x10^6；1x10^6
保存溫度：37℃；-198℃
運(yùn)輸方式：常溫保溫運(yùn)輸；干冰運(yùn)輸
安全等級：1
用途限制：僅供科研4類
培養(yǎng)體系：DMEM高糖+10%FBS+1%三抗
培養(yǎng)溫度：37℃
二氧化碳濃度：5%
簡介：兔骨髓瘤細(xì)胞240E懸浮培養(yǎng)。
注釋：Group:Hybridoma fusion partner cell line.
Selected for resistance to:ChEBI;CHEBI:63486;8-azaguanine.
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
收到細(xì)胞后的處理方法
1、收到常溫細(xì)胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、若觀察到異?；蛘邔?xì)胞有疑問，請及時跟我們聯(lián)系；對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
培養(yǎng)方法
1、取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內(nèi)，固定在泡沫板上。
2、用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側(cè)找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養(yǎng)皿中。
3、用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。
4、將篩網(wǎng)置于平皿中，脾臟置于篩網(wǎng)上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5、將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。
6、加入10ml培養(yǎng)液，吹打混勻，取樣計數(shù)。
7、將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中，輕輕搖晃混勻，在培養(yǎng)瓶上。
培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1、工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺（至少ClassⅡ）。
2、操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。
3、定期檢測下列項(xiàng)目：CO2鋼瓶之CO2壓力CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。無菌操作臺內(nèi)之a(chǎn)irflow壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。
4、水槽可添加消毒劑（Zephrin1:750），定期更換水槽的水。
5、粉末培養(yǎng)基配制好后（加了血清），一般在4度盡量不要超過1個月，如在-20度存放時間可長一些，但也不要超過3-4個月，可能對于永生化細(xì)胞株來說要求不是太高，細(xì)胞嬌弱，放置時間不宜過長。
6、開紫外線照射臺的時候，就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后，溫度也升上來了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生，有的常年不清洗，里面很臟，容易在外面瓶身上吸附大量細(xì)菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后，找個毛巾擦干上面的水。
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