層出鐮孢菌是Fusarium屬的微生物,原產(chǎn)地為中國。菌絲細(xì)、有隔, 大型分生孢子微彎曲呈鐮刀形, 具3~ 5 隔;小型分生孢子棒形, 0~ 1 隔, 鏈狀著生在分生孢子梗上, 孢子鏈對生呈“V ”型。不產(chǎn)生厚垣孢子。主要用途為研究;教學(xué)。
一、菌種簡介
平臺編號:Bio-19359
規(guī)格:培養(yǎng)物
拉丁屬名:Fusarium Proliferatum
中文名稱:鐮刀菌屬
拉丁屬名:Fusarium
種名加詞:proliferatum (Matsush.) Nirenberg ex Gerlach & Nir
收藏時(shí)間*:2007-11-5
來源歷史:北京林業(yè)大學(xué)
原產(chǎn)國:中國
資源歸類編碼:15151916102
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;教學(xué)
特征特性:菌絲細(xì)、有隔, 大型分生孢子微彎曲呈鐮刀形, 具3~ 5 隔; 小型分生孢子棒形, 0~ 1 隔, 鏈狀著生在分生孢子梗上, 孢子鏈對生呈“V ”型。不產(chǎn)生厚垣孢子
生物危害程度:四類
寄主中文名稱:合歡
致病對象:植物
分離基物:合歡
采集地區(qū):甘肅天水
采集具體地點(diǎn):花壇
培養(yǎng)基信息:培養(yǎng)基編號: 14 培養(yǎng)基名稱: PDA
培養(yǎng)溫度:25
資源保護(hù)類型:培養(yǎng)物
保藏方法:定期移植法
共享方式:資源交換性共享
提供形式:斜面培養(yǎng)物
實(shí)物狀態(tài):有實(shí)物
用途:研究
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))
二、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一種)、原種(二種)和栽培種(三種)三。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備(見圖) 菌種制備 ,其中(1)~(4)為孢子制備過程。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
放線菌孢子的培養(yǎng)基大多是采用麩皮或豌豆浸出液及無機(jī)鹽與瓊脂制成的。將斜面孢子接入擴(kuò)大的扁瓶孢子培養(yǎng)基中,于28~37℃培養(yǎng)5~14天。所獲得的大量孢子可直接作為種子罐(6)的種子。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶(5)液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐(7)的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
四、操作流程
菌株復(fù)蘇:(按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇)
1)所有菌株,顯色培養(yǎng)基分4區(qū),每區(qū)一株,標(biāo)明菌株號、菌種名常用縮寫如下:
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌,其他菌種標(biāo)記全名
2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h
菌種鑒定:(48h后觀察結(jié)果)
五、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間:細(xì)菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前,建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,如在說明建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長起來,請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時(shí)或者更長時(shí)間,直至菌種培養(yǎng)完成,有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,一般來說菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、初次使用時(shí)請嚴(yán)格按照本說明書推薦條件和操作步驟進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負(fù)責(zé)任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時(shí),在操作過程中應(yīng)嚴(yán)格控制厭氧條件:制作培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)使用厭氧螺口試管,并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)基中的氧氣,使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站(www.family998.com)。
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