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共生梭菌的培養(yǎng)方法與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及使用范圍!
小楊 / 2023-07-27 10:11:13


梭桿菌屬是人類和動物的身體共生菌之一,主要定植在人類和動物的粘膜中,兩個(gè)最主要的聚集地是口腔和結(jié)腸,某些類型物種屬于機(jī)會性病原體,會引起菌血癥和各種快速進(jìn)展的感染。這些微生物比大多數(shù)正常的厭氧菌群更具毒性,產(chǎn)生重要的 脂多糖(LPS),內(nèi)毒素和溶血素等,這可能是毒力的原因。

一、菌種簡介
平臺編號:Bio-115243
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Clostridium Symbiosum
中文名稱:共生梭菌
拉丁名稱:Clostridium symbiosum
來源歷史:ATCC
原始編號:2, M. Sebald LSU
原產(chǎn)國:美國
模式菌株:是
主要用途:用于溶組織變形蟲的培養(yǎng)
生物安全級別:一級
其它保藏中心編號:ATCC 14940
培養(yǎng)基編號:100
培養(yǎng)溫度:37℃
培養(yǎng)時(shí)間:24-48h
需氧類型:專性厭氧
保存方法:冷凍干燥管保藏
用途:用于溶組織變形蟲的培養(yǎng)
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

二、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用;
2、產(chǎn)品僅限用于科研本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢種群;
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時(shí)使用。

三、產(chǎn)品優(yōu)勢
1、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,是為科研和 提供微生物菌種資源共享服務(wù)的專業(yè)平臺。
2、國內(nèi)首創(chuàng)封閉管包裝,凍干后的菌株使用時(shí)添加配套的復(fù)蘇培養(yǎng)基后迅速而完全溶解。針對不同的菌株提供八種不同的培養(yǎng)方法,保證菌種的復(fù)蘇質(zhì)量。
3、嚴(yán)格的質(zhì)檢程序,確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
4、該類產(chǎn)品廣泛使用到食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、化工等行業(yè),疾控中心、質(zhì)檢局、出入境、藥檢局等等,得到廣泛好評。

四、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些 菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 
4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌

六、使用范圍
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分精確,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。 
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。 
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。

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