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小鼠腎臟巨噬細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室分離方法與質(zhì)量檢測(cè)!
小楊 / 2023-08-21 09:23:40


一、產(chǎn)品信息
平臺(tái)編號(hào):Bio-73065
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:原代細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:小鼠腎臟巨噬細(xì)胞
組織來(lái)源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
用途:研究
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

二、細(xì)胞簡(jiǎn)介
小鼠腎臟巨噬細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來(lái)源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。

三、方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎臟巨噬細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

四、質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎臟巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

五、培養(yǎng)信息
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 
換液頻率 每2-3天換液一次 
生長(zhǎng)特性 貼壁 
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣 
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 
消化液 利多卡因(12mM) 
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 
小鼠腎臟巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

六、傳代操作流程
1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2、加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3、T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5、消化到細(xì)胞間隙變大,但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6、混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7、加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8、補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);

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