生金(金霉素)鏈霉菌的孢子絲柔曲,初旋至松敞螺旋形。孢子卵圓形至柱形,表面光滑。主要用于產(chǎn)生氯四環(huán)素,金霉素,四環(huán)素。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-01680
提供形式 凍干物
拉丁屬名:Streptomyces Aureofaciens
中文譯名:生金色鏈霉菌(金霉素鏈霉菌)
拉丁學(xué)名:Streptomyces aureofaciens
原始編號(hào):A-249
菌株來(lái)源:←中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院抗生素研究所
直接來(lái)源國(guó)家:中國(guó)
保藏時(shí)間:12/1/1959
其他保藏編號(hào):=NRRL 2209 =JCM 4008 =ATCC 10762 =DSM 40127 =ATCC 10762 =ATCC 23884 =CBS 664.68 =IFO 12594 =IFO 128
生物危害:四類(lèi)
模式菌株:模式菌株
菌株用途:金霉素;模式菌株;Produces aureomycin , chlortetracycline, tetracycline
培養(yǎng)溫度:28℃
培養(yǎng)基:0038
用途:模式菌株;產(chǎn)生氯四環(huán)素,金霉素,四環(huán)素
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))
二、培養(yǎng)基
ISP-2 培養(yǎng)基
酵母提取物 4.0 g 麥芽提取物 10.0 g 葡萄糖 4.0 g 瓊脂 15.0 g
蒸餾水 1.0 L PH 7.3
三、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。
四、培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
五、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間:細(xì)菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前,建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長(zhǎng),如在說(shuō)明建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長(zhǎng)起來(lái),請(qǐng)繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時(shí)或者更長(zhǎng)時(shí)間,直至菌種培養(yǎng)完成,有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng),一般來(lái)說(shuō)菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)推薦條件和操作步驟進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類(lèi)型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負(fù)責(zé)任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時(shí),在操作過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制厭氧條件:制作培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)使用厭氧螺口試管,并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)基中的氧氣,使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請(qǐng)參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站(www.family998.com)。
六、保存方法
1、傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
2、液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
3、懸液保存法:
①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
4、載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
5、常用的冷凍保存法:
①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③液氮保存法(-196℃):是適用范圍最廣的微生物保存法。
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