溫和氣單胞菌，Aeromonas sobria，Aero-表示產(chǎn)生氣體，monas是指單細(xì)胞的有機(jī)體， sobria的意思是溫和的，不激烈的。Aeromonas的全部意思就是產(chǎn)生氣體的單細(xì)胞有機(jī)體。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào)：Bio-75006
規(guī)格：Freeze-Dried
拉丁屬名：Aeromonas Sobria
菌株名稱：溫和氣單胞菌
解釋：產(chǎn)生氣體的單細(xì)胞有機(jī)體
分類地位：兼性厭氧細(xì)菌
用途：ATCC原裝進(jìn)口
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、詳細(xì)描述
Aeromonas sobria Popoff and Veron菌株拉丁名
(ATCC 43979)菌株編號(hào)
Permits and Restrictions View Permits
Strain Designations 菌株別名 NCIB 12065 [CDC 9358-7b]
Isolation 分離源 Fish
Biosafety Level生物安全等級(jí) 1
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format提供形式 freeze-dried
Storage Conditions 保藏方法
Frozen: -80℃ or colder
Freeze-Dried 凍干物: 2℃ to 8℃
Live Culture 活菌: See Propagation Section
Preceptrol no
Images ATCC 43979 Photomicrograph
Type Strain模式菌株 yes
Medium培養(yǎng)基 ATCC? Medium 18: Trypticase Soy Agar/Broth
Growth Conditions生長(zhǎng)條件
Temperature培養(yǎng)溫度: 30℃
Atmosphere需氧情況: Aerobic
Name of Depositor NCIMB
Chain of Custody來(lái)源國(guó)家 ATCC <-- NCIMB <-- CIP 74-33 <-- MY Popoff 208
Isolation分離源 Fish
References參考文獻(xiàn) Popoff M, Veron M. A taxonomic study of the Aeromonas hydrophila-Aeromonas punctata group. J. Gen. Microbiol. 94: 11-22, 1976. PubMed: 932684
Validation list no. 6. Int. J. Syst. Bacteriol. 31: 215-218, 1981.
Cross References Nucleotide (GenBank) : X74683 A.sobria (ATCC 43979T) gene for 16S ribosomal RNA.
三、微生物培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
四、操作流程
菌株復(fù)蘇:(按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇)
1) 所有菌株,顯色培養(yǎng)基分4區(qū),每區(qū)一株,標(biāo)明菌株號(hào)、菌種名常用縮寫如下:
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌,其他菌種標(biāo)記全名
2) 隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h
菌種鑒定:(48h后觀察結(jié)果)
五、保存方法
1、傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
2、液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
3、懸液保存法：
①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
4、載體保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
5、常用的冷凍保存法：
①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③液氮保存法(-196℃):是適用范圍最廣的微生物保存法。
微生物菌種查詢網(wǎng)作為中國(guó)微生物菌種中心引航者，單位代為引進(jìn)美國(guó)ATCC微生物菌種保藏中心，德國(guó)DSMZ菌種保藏中心，荷蘭CBS菌種保藏中心，日本JCM微生物菌種保藏中心，包括其中的ATCC微生物細(xì)菌與噬菌體（18382）；細(xì)胞系和雜交瘤（4997）；真菌和酵母（58183）；原代細(xì)胞（146）；原生動(dòng)物和藻類（2428）；干細(xì)胞（102）；載體，克隆與分子（18006）；病毒（3594）；核酸 - DNA / RNA（1350），引進(jìn)進(jìn)口微生物菌種貨期短，質(zhì)量保證，UPS國(guó)際快遞運(yùn)輸。