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原代細(xì)胞小鼠浦肯野細(xì)胞的分離方法與質(zhì)量檢測(cè)!
小楊 / 2023-09-14 09:11:38


一、產(chǎn)品信息
平臺(tái)編號(hào):Bio-132590
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:原代細(xì)胞
細(xì)胞名稱(chēng):小鼠浦肯野細(xì)胞
組織來(lái)源:小腦組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞用途:研究
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

二、細(xì)胞簡(jiǎn)介
小鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織;小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),叫小腦皮質(zhì),小腦皮質(zhì)分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)唯一的傳出纖維,終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞(Purkinje cell)是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的唯一能夠傳出沖動(dòng)的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬(wàn)個(gè)浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),傳導(dǎo)速度快,可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,具有舒張期自動(dòng)除極化的性能,因而有自律性,但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞。這類(lèi)細(xì)胞常常平行排列,細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。小腦:浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元,細(xì)胞體呈梨形,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹(shù)突,向外伸入分子層。主樹(shù)突沿途分支繁茂,形如展開(kāi)的、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長(zhǎng)軸垂直的平面上。樹(shù)突分支上有大量的樹(shù)突棘,與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部(與主樹(shù)突相對(duì)方向)發(fā)出,細(xì)長(zhǎng),離開(kāi)胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開(kāi)皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),組成小腦皮質(zhì)唯一的傳出纖維,終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大,約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束,小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內(nèi)充滿(mǎn)糖原顆粒、線粒體和肌漿網(wǎng),細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無(wú)橫管系統(tǒng),但膜電容比收縮細(xì)胞大,可能是由于其閏盤(pán)結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤(pán)的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。

三、方法簡(jiǎn)介
小鼠浦肯野細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專(zhuān)用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶

四、質(zhì)量檢測(cè)
小鼠浦肯野細(xì)胞經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

五、培養(yǎng)信息
包被條件 PLL(0.1mg/ml) 
培養(yǎng)基 含脂質(zhì)濃縮液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等 
換液頻率 每2-3天換液一次 
生長(zhǎng)特性 貼壁 
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣 
傳代特性 不增殖;不傳代 
消化液 0.25%胰蛋白酶 
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 
小鼠浦肯野細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

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