側(cè)孢短芽孢桿菌,桿狀,G+,形成橢圓形內(nèi)生芽孢,好氧。可耐1%-7%NaCl濃度。主要用于研究,生產(chǎn),抑制金黃色葡萄球菌。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-59492
提供形式:凍干物
拉丁屬名:Brevibacillus Laterosporus
中文名稱:側(cè)孢短芽孢桿菌
屬名:Brevibacillus
種名加詞:laterosporus
來(lái)源歷史:←中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院(LQ61)
收藏時(shí)間:2007.1.31
原始編號(hào):TF1
資源歸類編碼:15131311101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;生產(chǎn)
具體用途:抑制金黃色葡萄球菌
特征特性:桿狀,G+,形成橢圓形內(nèi)生芽孢,好氧??赡?%-7%NaCl濃度。麥芽糖、半乳糖、木糖、果糖產(chǎn)酸;葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、棉子糖不產(chǎn)酸。不分解淀粉,接觸酶、氧化酶陽(yáng)性。
生物危害程度:四類
致病對(duì)象:無(wú)
分離基物:土茯苓
采集地:北京
培養(yǎng)基:酵母提取物 0.5g,甘露醇 20.0g,KH2PO4 0.2g,K2HPO4 0.8g,MgSO4.7H2O 0.2g,CaSO4·2H2O 0.1g,F(xiàn)eCl3 微量,Na2MoO4·2H2O 微量,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.2。
培養(yǎng)溫度:35-37℃
資源保藏類型:培養(yǎng)物
保存方法:真空冷凍干燥法
實(shí)物狀態(tài):有實(shí)物
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
源數(shù)據(jù)主鍵:21185
用途:研究;生產(chǎn);抑制金黃色葡萄球菌
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))
二、形態(tài)特征
在延遲期,短芽孢桿菌為革蘭氏染色陰性,菌體呈細(xì)長(zhǎng)的桿狀;在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,為革蘭氏染色陽(yáng)性,菌體成短而粗的桿狀;在靜止期,革蘭氏染色又轉(zhuǎn)為陰性,菌體成細(xì)長(zhǎng)的桿狀,偶爾也能觀察到橢圓形的芽孢。圖1是50號(hào)菌用1%H2SO4(pH6.8)負(fù)染后的電鏡照片:菌體桿狀、周生鞭毛、大小約0.88μm×2.2μm。
三、生理生化特征
不從碳水化合物產(chǎn)氣;不水解淀粉;兼性厭氧,葡萄糖培養(yǎng)液中培養(yǎng)物的pH小于8.0。
四、生防特點(diǎn)
作為非脊椎動(dòng)物的病原菌,有關(guān)研究人員曾報(bào)道了這種細(xì)菌的殺線蟲(chóng)能力,由于所報(bào)道的這些側(cè)孢短芽孢桿菌菌株都不產(chǎn)生伴孢晶體,所以這些菌株的殺線蟲(chóng)毒力因子并非來(lái)自于具有特征性的伴孢晶體。然而,Smirnova TA,et al.分離到了2株能形成大的伴孢晶體的側(cè)孢短芽孢桿菌菌株,這兩株菌顯示出很強(qiáng)的殺昆蟲(chóng)能力,研究證實(shí),這種能力與菌體在形成芽孢過(guò)程中的伴孢晶體相關(guān)。有趣的是,Singer的實(shí)驗(yàn)表明,一株側(cè)孢短芽孢桿菌的殺線活性源于一個(gè)熱穩(wěn)定蛋白的毒性。所有這些研究表明,不同側(cè)孢短芽孢桿菌菌株擁有不同的線蟲(chóng)致病因子。牛秋紅研究小組分離到的側(cè)孢短芽孢桿菌G4菌株具有顯著的殺線蟲(chóng)功能,但其并不產(chǎn)生伴孢晶體。從該菌株的發(fā)酵液里提取的粗蛋白酶液在12h內(nèi)能殺死所有測(cè)試線蟲(chóng)并在24h內(nèi)完全降解。從側(cè)孢短芽孢桿菌G4菌株中純化出的絲氨酸胞外蛋白酶可水解多種底物,包括膠原和線蟲(chóng)體壁,具有很強(qiáng)的殺線蟲(chóng)能力,組織病理電鏡實(shí)驗(yàn)證實(shí)這種蛋白酶嚴(yán)重破壞了線蟲(chóng)體壁。而且,蛋白酶將線蟲(chóng)體壁分解成為一些氨基酸或小肽,這些營(yíng)養(yǎng)物使病原細(xì)菌更好的生長(zhǎng)繁殖。該蛋白酶基因異源表達(dá)的菌株表現(xiàn)出了明顯的殺線蟲(chóng)活性,重組蛋白酶在體外對(duì)線蟲(chóng)體壁降解,而蛋白酶缺失菌株喪失了大部分的殺線活性,死亡線蟲(chóng)在生測(cè)中保持了完整的體壁,表明蛋白酶在線蟲(chóng)侵染中起主要作用。
五、注意事項(xiàng)
1)凍干粉首次活化,干粉要全部用完,不能預(yù)留,用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液(即以上建議的培養(yǎng)基配方,不加瓊脂)或者無(wú)菌水,滴入凍干管中,輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液,接種在培養(yǎng)基上(建議不超過(guò) 2 支平板或者斜面,若接種液體培養(yǎng)基,則試管液體不超過(guò) 5ml 為宜);
2)經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏,菌種處于休眠狀態(tài),復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng),這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間; 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物(非凍干菌),則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn),或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處,請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;
3)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退;
4)菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;
5)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年;
6)菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或不活,請(qǐng)?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系,逾期不予受理;
7)打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部,保護(hù)眼睛。
8)安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò) 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍,并保持在火焰旁操作。
9)甘油管使用:使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
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