DH5α感受態(tài)細(xì)胞是一種可以用于常規(guī)質(zhì)粒高效轉(zhuǎn)化的質(zhì)?？寺』瘜W(xué)感受態(tài)細(xì)胞，是實(shí)驗(yàn)室最為常用的大腸桿菌菌株之一，廣泛用于基因克隆，藍(lán)白篩選，質(zhì)粒穩(wěn)定擴(kuò)增等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。該菌株缺失核酸內(nèi)切酶(endA)，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；重組酶缺陷型(recA) 減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；lacZΔM15是表達(dá)β -半乳糖苷酶α片段的一段基因，當(dāng)M15缺失(△M15)時(shí)，lacZ基因雖然能表達(dá)ω片段，但不能表達(dá)α片段，β -半乳糖苷酶沒有活性。
一、基本信息
平臺(tái)編號(hào)：Bio-105941
規(guī)格：20×0.05ml
拉丁屬名：DH5α感受態(tài)細(xì)胞
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、產(chǎn)品說明
大腸桿菌DH5α是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株，在使用pUC系列的質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)，可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選鑒別重組菌株。基因型：F-,φ80dlacZ△M15,△(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1。
三、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、DNA穩(wěn)定性高。
2、有利于高純度DNA提取。
3、可用于藍(lán)白斑實(shí)驗(yàn)
4、轉(zhuǎn)化效率高達(dá)1-3×109cfu/μg
四、操作步驟
1、取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，放置10分鐘。
2、向感受態(tài)細(xì)胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的質(zhì)粒DNA，輕輕地敲打4-5下。
3、冰浴30分鐘，不要震蕩。
4、42℃熱擊45-60秒，不要震蕩，迅速轉(zhuǎn)移到冰浴中，放置2分鐘。
5、加入950μl室溫的SOC培養(yǎng)基。
6、混勻后，置于37℃的搖床上，250rpm震蕩培養(yǎng)60min。
7、將含有抗生素的平板加熱到37℃，放置半個(gè)小時(shí)，使其表面干燥，易于均勻涂布。
8、根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，取適量轉(zhuǎn)化的感受態(tài)的細(xì)胞，加到含有抗生素的固體瓊脂糖培養(yǎng)基上（LB或SOC），用無菌棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃培養(yǎng)箱，倒置過夜培養(yǎng)（8-12h）。
五、產(chǎn)品的運(yùn)輸和儲(chǔ)藏
干冰運(yùn)輸，收到后請(qǐng)置于-80℃。
六、注意事項(xiàng)
1、剛剛?cè)诨募?xì)胞，轉(zhuǎn)化效率最高
2、避免反復(fù)凍融
3、避免用移液槍吸吹
4、整個(gè)操作過程要輕柔
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