里氏木霉（Trichodermareesei）是多細(xì)胞的真核微生物，紅褐肉座菌(Hypocrea jecorina)的無性型,隸屬于叢梗孢目（Moniliales）木霉屬（Trichoderma）。其作為工業(yè)菌株用于生產(chǎn)分解不同植物材料的酶類，包括纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶等，已有多年歷史。
一、菌種簡介
平臺編號：Bio-68004
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Trichoderma Reesei
菌株名稱：里氏木霉
培養(yǎng)基編號：13
培養(yǎng)溫度：25℃
培養(yǎng)時間：5-7 天
用途：產(chǎn)纖維素酶
培養(yǎng)基信息
培養(yǎng)基編號：13
名稱：Wort Agar （麥芽汁瓊脂）
可用于培養(yǎng)菌種：適用范圍：克魯斯假絲酵母、郎比可假絲酵母、解脂假絲酵母、馬其頓假絲酵母、擬熱帶假絲酵母、粗壯假絲酵母
備注：Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (將發(fā)酵啤酒的原料（未加酒花），稀釋至12柏林，加瓊脂15克，溶化后分裝。15磅滅菌30分鐘。)
用途：產(chǎn)纖維素酶
注意事項：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)基
綜合馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA）
20%馬鈴薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量約 8mg Agar (瓊脂) 20g pH 自然
20%馬鈴薯汁配制方法：馬鈴薯洗凈去皮，取 200 克切成小塊 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分鐘后濾去馬鈴薯塊，將濾液補足 1000ml。
三、產(chǎn)品特點
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用效果顯著；
2、本品芽孢含量高，穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓；
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境；
4、復(fù)活迅速，可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢種群；
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境；
6、對多數(shù)抗生素不敏感，可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時使用。
四、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
五、保藏條件
安瓿瓶凍干菌種和培養(yǎng)物應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶菌種請置于-20℃冷凍。甘油保藏溫度為-80°C;請勿長期置于室溫。
六、注意事項
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支平板或者斜面，若接種液體培養(yǎng)基，則試管液體不超過 5ml 為宜）；
2）經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或不活，請在收到后 2 個月內(nèi)和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系，逾期不予受理；
7）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
9）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會逐漸下降。
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