人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞分離自直腸原位癌。人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞系在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下匯合后，自發(fā)分化為腸上皮樣細(xì)胞，是常用的腸癌細(xì)胞模型。當(dāng)長(zhǎng)到滿時(shí)，細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白II，并呈角質(zhì)蛋白陽性。
一、細(xì)胞簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào)：Bio-72991
規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息：Caco-2/CACO2
細(xì)胞名稱：Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)(STR鑒定正確)
細(xì)胞別稱：CaCo-2; CACO-2; Caco 2; CACO 2; CACO2; CaCo2; CaCO2; Caco2; Caco-2/ATCC
背景描述：Caco-2細(xì)胞分離自直腸原位癌；當(dāng)長(zhǎng)到滿時(shí)，Caco-2細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白Ⅱ，并呈角質(zhì)蛋白陽性。
種屬：人
年齡（性別）：男；72歲
組織來源：結(jié)腸，結(jié)直腸腺癌
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型：腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型：腸癌細(xì)胞
生物安全等級(jí)：1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基：MEM（含NEAA）＋20% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例：1:3-1:4
推薦換液頻率：2~3次/周
凍存條件：凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃
用途：(STR鑒定正確)
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)方式
1、培養(yǎng)基：CACO2 專用培養(yǎng)基【MEM＋20% FBS＋1% P/S +1%NEAA】
2、培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5%CO2
3、傳代培養(yǎng)：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上時(shí)，可以進(jìn)行傳代，傳代比例 1:2~1:4，3~5 天傳代一次。
（1）用巴氏滴管吸出細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；
（2）加入 1ml 的 PBS，輕輕晃動(dòng)潤(rùn)洗細(xì)胞，然后將 PBS 吸出；
（3）加入 2ml 的胰酶，輕輕晃動(dòng)浸潤(rùn)細(xì)胞，然后放在培養(yǎng)箱內(nèi)消化消化 3~5 分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間）；
（4）在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞便開始脫落，這時(shí)可以終止消化；
（5）加入 4ml 含血清的完全培養(yǎng)基，用移液器吹打細(xì)胞，使細(xì)胞脫落并形成單細(xì)胞懸液；
（6）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到 15ml 的離心管，1000rpm 離心 5min；
（7）離心完成后吸出上清丟棄，再用移液管取 10ml 完全培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸，輕輕吹打混勻；
（8）將細(xì)胞懸液分裝到兩個(gè)新的 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，放在 37℃的 CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。傳代后細(xì)胞貼壁較慢，48h 內(nèi)不要換液；細(xì)胞形態(tài)不均一，有一些含有液泡的巨大細(xì)胞， 屬正?，F(xiàn)象。
4、細(xì)胞凍存：使用本公司無血清凍存液可直接將細(xì)胞凍存在-80℃（無需使用程序降溫盒），細(xì)胞在-80℃可保存 3 年，長(zhǎng)期保存建議使用液氮罐。
5、冷凍復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 4-6mL 完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6cm 皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
三、質(zhì)量檢測(cè)
1、STR 鑒定：正確
2、細(xì)菌檢測(cè)：陰性
3、支原體檢測(cè)：陰性
四、售后服務(wù)
1、收到細(xì)胞后請(qǐng)及時(shí)查看瓶身有無破損，是否漏液等現(xiàn)象；
2、用 75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶之后，放在培養(yǎng)箱中靜置 2-4 小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄，40 倍和 100 倍照片各一張（細(xì)胞在運(yùn)輸過程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正?，F(xiàn)象）；
3、原瓶中的培養(yǎng)基在細(xì)胞傳代之后不建議繼續(xù)使用，請(qǐng)配制新的完全培養(yǎng)基或者購(gòu)買本公司的專用培養(yǎng)基；
4、建議定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照記錄；收到細(xì)胞后 7 天內(nèi)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)有任何問題，可申請(qǐng)售后。
5、強(qiáng)烈建議：在第一次細(xì)胞傳代時(shí)，使用附贈(zèng)或者購(gòu)買本公司配置的細(xì)胞培養(yǎng)瓶將細(xì)胞按照 1:2 進(jìn)行傳代，可以對(duì)比測(cè)試自配的培養(yǎng)基是否可以養(yǎng)好細(xì)胞。如果有以上任何問題，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系本公司。
五、注意事項(xiàng)
1、細(xì)胞貼壁慢特別是剛復(fù)蘇時(shí)，一般兩到三天貼壁展開，會(huì)有空泡；
2、細(xì)胞在傳代細(xì)胞中注意消散，不然難貼壁；
3、成團(tuán)生長(zhǎng)，細(xì)胞密度越大，表面空泡黑點(diǎn)越多；
4、一般細(xì)胞長(zhǎng)至80%傳代，細(xì)胞成片，其實(shí)密度很大；
5、細(xì)胞生長(zhǎng)太滿對(duì)細(xì)胞狀態(tài)影響嚴(yán)重，傳代后易碎，死亡；
6、細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間越久，消化難度也會(huì)隨之增加；消化到輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊細(xì)胞可以滑落的時(shí)候可以終止。
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